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上海寶葉生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員·5年您現(xiàn)在的位置： 首頁(yè)> 公司動(dòng)態(tài)> gⅥ-cDNA融合噬菌體ELISA
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[方法]
1．用200ul PBST沖洗鏈霉素包被的微量濃度測(cè)定板的每個(gè)孔3次。
2．在2mol/LPBS中稀釋生物素配體（BAS噬菌體—ELISA）或生物素捕獲抗體（ISA噬菌體—ELISA），直到終濃度為10—50nmol/l，再加100ul這種溶液到農(nóng)度測(cè)定板中的每個(gè)孔中。
3．在室溫下孵育濃度測(cè)定板1小時(shí)。
4。用200ul PBST沖洗每個(gè)孔5次。
5．在2mol/LPBS中稀釋噬菌體溶液到濃度為1×1011TU/ml，在*次用來稀釋IAS融合噬菌體的2mol/LPBS中加入誘餌血清或預(yù)免疫血清，再將100ul這種懸浮液轉(zhuǎn)移到每個(gè)孔中。
6．在室溫下孵育濃度測(cè)定板2小時(shí)。
7，用200ul PBST沖洗每個(gè)孔5次。
8。加100ul HRP/抗M13連接物（PBS2M稀釋為1：5000）。
9。室溫下孵育濃度測(cè)定板l小時(shí)。
10．用200ul PBST沖洗每個(gè)孔5次。
11．向每個(gè)孔中加100ul TMB底物溶液。
12．室溫下孵育濃度測(cè)定板15～30分鐘（或直到顏色發(fā)生變化）。
13．用100ul 2 mol/L H2SO4停止反應(yīng)。
14．在450nm讀吸收值。
