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南京大學(xué)證實猴子種系獲得Cas9/RNA介導(dǎo) 的基因修飾

時間:2015/1/15閱讀:724
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南京大學(xué)模式動物所證實猴子種系獲得Cas9/RNA介導(dǎo)
的基因修飾

2015年01月12日 瀏覽量: 37 次 評論(0) 來源:南京大學(xué)模式動物研究所 作者:南京大學(xué)模式動物研究所責(zé)任編輯:wlladmin

摘要:南京大學(xué)模式動物研究所的黃行許(Xingxu Huang)博士、南京醫(yī)科大學(xué)的沙家豪(Jiahao Sha)教授,以及云南省靈長類生物醫(yī)學(xué)重點實驗室季維智( Weizhi Ji )等研究人員,在2014年12月23日的《細(xì)胞研究》(Cell Research)雜志上發(fā)表Letter文章稱,繼今年他們成功地利用CRISPR/Cas9系統(tǒng)對孿生食蟹猴進(jìn)行基因組修飾后,在后續(xù)的研究中他們進(jìn)一步證實了猴子生殖系細(xì)胞獲得了Cas9/RNA介導(dǎo)的基因修飾。

南京大學(xué)模式動物研究所的黃行許(Xingxu Huang)博士、南京醫(yī)科大學(xué)的沙家豪(Jiahao Sha)教授,以及云南省靈長類生物醫(yī)學(xué)重點實驗室季維智( Weizhi Ji )等研究人員,在2014年12月23日的《細(xì)胞研究》(Cell Research)雜志上發(fā)表Letter文章稱,繼今年他們成功地利用CRISPR/Cas9系統(tǒng)對孿生食蟹猴進(jìn)行基因組修飾后,在后續(xù)的研究中他們進(jìn)一步證實了猴子生殖系細(xì)胞獲得了Cas9/RNA介導(dǎo)的基因修飾。

在猴子中實現(xiàn)基因打靶將大大的推進(jìn)人類疾病模型的發(fā)展。盡管少量的猴子模型已經(jīng)順利產(chǎn)生,但是大多數(shù)過去使用靈長類做基因打靶的努力都不幸失敗了??芍匦戮幊痰膬?nèi)切核酸酶的方法,例如ZFN(鋅指核酸酶)、TALEN(轉(zhuǎn)錄激活樣效應(yīng)因子核酸酶)和CRISPR(成簇的規(guī)律間隔性短回文重復(fù)序列)/Cas系統(tǒng)為在猴子中實現(xiàn)基因修飾開啟了新途徑。在以上的方法中,CRISPR/Cas9系統(tǒng)被認(rèn)為是zui有效的基因打靶方法,其已成功應(yīng)用于多種動物物種中。

他們zui近的研究報告稱已在猴子上成功利用CRISPR/Cas9在猴子中介導(dǎo)了的基因打靶,Cas9核酸酶利用一個小型的導(dǎo)向RMA通過堿基配對被定向到一個特殊的基因位點。通過顯微注射cas9 mRNA和靶向 3種sgRNAs基因NR0B1(細(xì)胞核受體亞科0 b組成員1)、PPAR-γ(過氧化物酶體增殖物活性受體γ)、和RAG1(重組活化基因1)進(jìn)入單細(xì)胞胚胎,他們在29只代孕食蟹猴中建立了10例妊娠。*組足月孿生猴被證實攜帶了Ppar-γ和Rag1靶基因突變,并且未檢測到任何的脫靶效應(yīng)。隨后他們利用TALEN也在猴子中成功進(jìn)行了基因組操控。這些成果證明了在猴子中實現(xiàn)基因打靶的可行性。

然而,要建立遺傳上的改良猴子種群基因修飾的種系傳遞*。盡管以往有研究報告稱在猴子中成功實現(xiàn)了轉(zhuǎn)基因的種系傳遞,但對于CRISPR/Cas9在猴子中介導(dǎo)的基因組編輯能否傳遞至下一代仍有待確定。在這項研究中,他們著手檢測性腺和生殖細(xì)胞的基因靶效應(yīng)從而探索種系傳遞是否可能在Cas9處理的猴子中發(fā)生。
  在這篇文章中作者們報告稱,他們在后續(xù)的研究中進(jìn)一步證實了利用CRISPR/Cas9系統(tǒng)在猴子中實現(xiàn)基因編輯的可行性。此外,他們的數(shù)據(jù)證實了Cas9介導(dǎo)的誘變廣泛存在于各種體細(xì)胞組織和生殖腺中。更為重要的是,他們的研究在群體和單細(xì)胞水平上提供了重要的證據(jù)證實,Cas9介導(dǎo)的基因修飾存在于猴子的生殖系細(xì)胞中,且這些修飾極有可能通過猴子的生殖系細(xì)胞傳遞給下一代。雖然如此,作者們表示有關(guān)種系傳遞的直接證據(jù)還有待進(jìn)一步獲取。

此文轉(zhuǎn)發(fā)自:中國實驗動物信息網(wǎng) 

來源:南京大學(xué)模式動物研究所 作者:南京大學(xué)模式動物研究所

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