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艱難梭菌|4分鐘生成嚴(yán)格培養(yǎng)環(huán)境,City不City?
閱讀:131 發(fā)布時(shí)間:2024-8-1艱難梭菌(Clostridium difficile,CD)是一種產(chǎn)毒素的專性厭氧革蘭陽性芽孢菌,廣泛分布于人和動(dòng)物的腸道及環(huán)境中。因其對氧極為敏感,在傳統(tǒng)培養(yǎng)基上分離培養(yǎng)較困難,故命名為艱難梭菌。
在過去的十年里,艱難梭菌感染的頻率和嚴(yán)重程度在世界范圍內(nèi)不斷增加,成為引起抗生素相關(guān)性腹瀉和院內(nèi)感染的主要病原菌之一。2013年和2019年美國CDC《抗生素耐藥威脅報(bào)告》將艱難擬梭菌列為緊急威脅的耐藥菌。
艱難梭菌感染的危險(xiǎn)因素:
·抗生素使用(2-3月使用以上)
·住院(2-3個(gè)月長期住院)
·高齡(>65歲)
·鼻飼管和胃腸道治療
·胃酸抑制藥物-質(zhì)子泵抑制劑和組胺2(H2)受體拮抗劑
·免疫抑制狀態(tài)
·炎癥性腸病
·胃腸道手術(shù)
近年來,我國部分地區(qū)已檢測出高毒力株,表明艱難梭菌感染(Clostridium difficile infection,CDI)已對我國臨床構(gòu)成了威脅。同時(shí),研究表明我國的CDI分子流行病學(xué)特征具有自身特點(diǎn),使得CDI的防控形勢十分嚴(yán)峻。因此,臨床快速、準(zhǔn)確診斷CDI,對改善患者預(yù)后及節(jié)省我國醫(yī)療支出具有重要意義。
2017年我國發(fā)布了《中國成人艱難梭菌感染診斷和治療專家共識(shí)》,將艱難梭菌感染診斷標(biāo)準(zhǔn)更新為:患者出現(xiàn)中至重度腹瀉或腸梗阻,并滿足以下任一條件:(1)糞便檢測CD毒素或產(chǎn)毒型CD結(jié)果陽性;(2)內(nèi)鏡下或組織病理檢查顯示偽膜性腸炎。
目前,艱難梭菌的檢測方法可分為實(shí)驗(yàn)室檢測和臨床診斷策略。實(shí)驗(yàn)室檢測主要為菌株檢測、毒素的核酸檢測和毒性檢測。
菌株檢測中,厭氧培養(yǎng)法費(fèi)用較低、操作簡單,但仍需生物化學(xué)反應(yīng)鑒定且無法判定是否為產(chǎn)毒株,因此后續(xù)可通過PCR法或MALDI-TOF MS兩種技術(shù)對典型的艱難梭菌菌落進(jìn)行鑒定。
2019年發(fā)布的《MALDI - TOF MS在臨床微生物鑒定中的標(biāo)準(zhǔn)化操作專家共識(shí)》為臨床微生物的高效鑒定提供了規(guī)范性指導(dǎo)。目前,國內(nèi)已有實(shí)驗(yàn)室使用MALDI-TOF MS技術(shù)對經(jīng)培養(yǎng)法獲得的艱難梭菌疑似菌株進(jìn)行準(zhǔn)確鑒定,提升了臨床實(shí)驗(yàn)室鑒定艱難梭菌的水平及效率。
雖然目前艱難梭菌的檢測方法有多種,但糞便培養(yǎng)仍然是艱難梭菌檢測的金標(biāo)準(zhǔn)。在得到純培養(yǎng)的菌株后,后續(xù)還對培養(yǎng)后的菌株進(jìn)行毒素分型、分子分型,并檢測其耐藥性,方便臨床根據(jù)耐藥性結(jié)果給患者對癥下藥,減少抗生素濫用風(fēng)險(xiǎn)。除此之外,還能夠研究其傳播能力(如芽孢形成、黏附能力等)與傳播進(jìn)化機(jī)制,預(yù)防疾病的傳播。
《艱難梭菌感染診斷(T/CPMA 008-2020)》
在艱難梭菌糞便培養(yǎng)培養(yǎng)時(shí),需要先使用無水乙醇對糞便進(jìn)行前處理,然后使用特殊的培養(yǎng)基CCFA或CDMN,嚴(yán)格厭氧培養(yǎng)48-72h。
傳統(tǒng)培養(yǎng)方法:采用厭氧產(chǎn)氣袋培養(yǎng)。但由于產(chǎn)氣袋生成厭氧環(huán)境時(shí)間較長(40分鐘以上),細(xì)菌暴露在有氧環(huán)境中的時(shí)間較長,導(dǎo)致艱難梭菌檢出率偏低。
最新培養(yǎng)方案:如今用戶可選擇采用智能厭氧微生物培養(yǎng)系統(tǒng),實(shí)現(xiàn)更加嚴(yán)格的厭氧培養(yǎng)環(huán)境。例如,浙江省疾病預(yù)防控制中心,配合采用了DW-100A-K智能厭氧微生物培養(yǎng)系統(tǒng),厭氧環(huán)境的生成時(shí)間大幅縮短,避免樣本長時(shí)間暴露在有氧環(huán)境中,且生成氣體環(huán)境嚴(yán)格,大大提高了艱難梭菌檢出率。
DW-100A-K系列 智能厭氧微生物培養(yǎng)系統(tǒng)
儀器服務(wù)于各類厭氧菌微需氧菌和嗜二氧化碳菌的培養(yǎng)、檢驗(yàn),可根據(jù)需要選擇特定氧氣濃度(0%-15%可選)和CO2濃度(5%-15%可選)。儀器能快速生成環(huán)境,微需氧最快約2 min,厭氧最快約4 min,儀器穩(wěn)定可靠,確保重現(xiàn)性100%。
設(shè)備自帶五級自檢質(zhì)控(氣體輸入氣壓檢測、罐體連接性檢測、罐體泄漏性檢測、罐體密封性檢測、催化劑活性檢測),確保培養(yǎng)罐氣密性,嚴(yán)格保障厭氧環(huán)境。
產(chǎn)品優(yōu)勢:
1、一機(jī)多用:厭氧、微需氧和嗜CO2培養(yǎng);
2、快速生成環(huán)境:微需氧、CO2最快2 min,厭氧最快4 min;
3、脫機(jī)培養(yǎng):培養(yǎng)罐可從儀器上卸載、獨(dú)立控制,設(shè)置不同培養(yǎng)環(huán)境,培養(yǎng)過程密封,避免樣本泄漏;
4、罐體靈活配置:多種罐體可選,滿足不同培養(yǎng)需求;
5、QA質(zhì)控軟件:培養(yǎng)前5級質(zhì)控檢測,確保重現(xiàn)性100%。