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「表達載體、生產(chǎn)疫苗」：釀酒酵母的新可能
閱讀：799 發(fā)布時間：2022-1-18宮頸癌是常見的女性惡化腫瘤，其發(fā)生率在女性群體中僅次于乳腺癌。世衛(wèi)組織統(tǒng)計顯示，2020年全球?qū)m頸癌新發(fā)病例超過60.4萬例，其中近11萬例在中國。目前關(guān)于宮頸癌發(fā)生機制尚未*明確，主要與人乳頭狀瘤病毒（HPV）感染有關(guān)，其中HPV16、18、31、45型是宮頸癌的高危型。
為了對抗這一癌癥，人類研發(fā)出了HPV疫苗。HPV疫苗分為治療性疫苗和預(yù)防性疫苗，目前國家所提倡接種的HPV疫苗是預(yù)防性疫苗，主要使用基因工程技術(shù)進行生產(chǎn)，通過誘導(dǎo)特異性中和抗體，阻斷病毒的早期感染來預(yù)防病毒相關(guān)疾病的發(fā)生。
當(dāng)我們在接種HPV疫苗時，能看見疫苗包裝盒上有“釀酒酵母"的字眼。
釀酒酵母是什么？難道HPV疫苗的制作過程跟釀酒有關(guān)系嗎？
釀酒酵母（Saccharomyces cerevisiae），又稱面包酵母或者出芽酵母，細胞為球形或者卵形，直徑5-10μm，是第一個完成基因組測序的真核生物，測序工作于1996年完成。
作為一種單細胞真核生物，釀酒酵母具有一切真核細胞生命活動最基本特征，又有實驗所需微生物應(yīng)具備的代謝周期快、生長迅速、操作方便等許多優(yōu)點，一直是基礎(chǔ)及應(yīng)用研究的主要對象，在2000年被NIH選為標(biāo)準(zhǔn)微生物模型系統(tǒng)，在食品、醫(yī)藥等領(lǐng)域應(yīng)用廣泛。
重組全釀酒酵母疫苗是一種新型的基因工程疫苗，以釀酒酵母菌作為抗原表達載體構(gòu)建的重組全酵母疫苗，既能攜帶特異性目的抗原，又能揮發(fā)出免疫佐劑作用，能有效地誘導(dǎo)出抗原特異性的免疫應(yīng)答，該類疫苗已在抗腫瘤及抗病毒感染的防治研究中，顯示出了很好的研究價值和應(yīng)用前景。
1981年開始用釀酒酵母表達外源基因，目前利用釀酒酵母為宿主系統(tǒng)表達了許多外源基因產(chǎn)物，如乙型肝炎疫苗、人胰島素、人粒細胞集落刺激因子、人血管抑制素等。
釀酒酵母在自然界中分布較廣，屬于兼性厭氧微生物，主要是從冰葡萄汁或柑橘果中利用酵母浸出粉胨葡萄糖培養(yǎng)基和麥芽汁瓊脂平皿培養(yǎng)基分離純化而來。
1、富集培養(yǎng)：取適量樣品加入富集培養(yǎng)基，進行目標(biāo)菌株富集；
2、梯度稀釋：將富集培養(yǎng)液按10倍梯度進行稀釋；
DW-9系列微生物試劑分液器
DW-9系列微生物試劑分液器是一款精密輸送液體的電子蠕動泵分液系統(tǒng)，適用于培養(yǎng)基、緩沖液和稀釋液的自動批量分裝，廣泛應(yīng)用于各種食品、藥品企業(yè)、政府檢測機構(gòu)和科研單位的專業(yè)微生物實驗室。
3、分離純化：取梯度稀釋液均勻涂布于分離培養(yǎng)基，放置培養(yǎng)箱進行培養(yǎng)，然后再進行目標(biāo)菌株的初篩及復(fù)篩；
DW-16型自動細菌涂布接種儀
DW-16型自動細菌涂布接種儀由放置培養(yǎng)皿的可旋轉(zhuǎn)平臺（自動）和可變速驅(qū)動電機組成，是杭州大微專為“經(jīng)典培養(yǎng)法"微生物實驗中的“細菌涂布接種"環(huán)節(jié)而設(shè)計制造，塑料平皿適用。
4、菌種鑒定：通過形態(tài)學(xué)特征并結(jié)合生理生化實驗進行菌株鑒定。
杭州大微DW-M80型自動微生物生化鑒定系統(tǒng)通過生化反應(yīng)原理(包括酶底物反應(yīng)/糖利用反應(yīng)/同化反應(yīng)/氨基酸實驗等)捕獲細菌的生化表型特征，對微生物進行鑒定；結(jié)合微生物激光透射比色法，對抗菌藥敏試驗進行分析。
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