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【精子形態(tài)學(xué)染色試劑盒（巴氏快速法）品    名】

精子五聯(lián)檢：精子形態(tài)學(xué)染色試劑盒（巴氏快速法）

【研發(fā)依據(jù)】

精液中正常形態(tài)精子所占比例越低，生育機會越低，而流產(chǎn)、胎兒發(fā)育不良、死胎的可能性就越大；來自輔助生殖技術(shù)的資料表明，精子畸形指數(shù)(sperm deformity index，SDI)與體外受精有關(guān)，SDI>1.6時，體外受精率降低；多重異常指數(shù)（the multiple anomalies index, MAI）和畸形精子指數(shù)（teratozoospermia index，TZI）與體內(nèi)受精有關(guān)。世界衛(wèi)生組織（WHO）指出：正常形態(tài)精子≤4%時，將對男性的生育能力產(chǎn)生明顯影響。

【預(yù)期用途】

主要用于人類精子形態(tài)學(xué)染色，便于醫(yī)生在顯微鏡下觀察精子正常形態(tài)及計算缺陷精子比例，評價人類精子形態(tài)學(xué)質(zhì)量。也可用于其它哺乳動物精子形態(tài)學(xué)檢查。

【試劑特點】無須特殊儀器，簡單、快速、準(zhǔn)確。

【檢驗原理】

本染色方法系WHO推薦的巴氏染色法。因精子及細胞內(nèi)不同等電點的蛋白質(zhì)在相同的酸度下帶不同的電荷，能選擇性地結(jié)合相應(yīng)的染料而呈現(xiàn)不同的著色。胞核由酸性物質(zhì)組成，它與堿性染料的親和力較強；而胞漿則相反，它含有堿性物質(zhì)和酸性染料的親和力較大。用本試劑盒可以評價人類精子形態(tài)學(xué)特征，也可用于其它哺乳動物精子形態(tài)學(xué)檢查。

【組成成份】試劑配制的原料有：蘇木素、伊紅、磷鎢酸、亮綠、冰醋酸和酒精等。

【樣本要求】液化后的新鮮精液標(biāo)本

【操作方法】

1. 標(biāo)本準(zhǔn)備

（1）新鮮精液標(biāo)本*液化或貯存于-20℃的精液標(biāo)本復(fù)溫（室溫）。

（2）需要對精子進行洗滌后制片，方法如下： ① 在試管內(nèi)加入精液0.5ml和生理鹽水10 ml，充分混勻。 ② 2000轉(zhuǎn)離心10min，去掉大部分的上清液（必要時重復(fù)①②步驟）。 ③ 輕輕彈動試管使離心后的精子團懸浮于剩余的鹽水中，若精子濃度過高，則以生理鹽水適當(dāng)調(diào)整精子密度。

2．檢測步驟

（1）在一張潔凈的載玻片上，加入10—20μl精液，并將其均勻涂成一個圓形樣本區(qū)，涂制好的玻片水平放置，空氣中自然干燥。

（2）將干燥后的涂片在95%乙醇溶液中固定5—10分鐘。

（3）將已固定的涂片放入染液A中浸泡5分鐘，水洗。

（4）將涂片浸入染液B中5-10秒，水洗2遍后浸泡于清水中2分鐘。

（5）將涂片浸入95%乙醇2分鐘。

（6）將涂片在染液C中浸泡3分鐘，在95%乙醇中漂洗2次（各5—10秒）。干燥后滴加石蠟油（標(biāo)本片如需長期保存則需用“中性樹膠"封片），用光學(xué)顯微鏡觀察至少200個精子，分類計數(shù)精子的形態(tài)。

【染色結(jié)果】

精子頂體區(qū)呈淡藍色，頭部非頂體區(qū)呈深藍色，精子體尾部呈紅色。

【參考值】

（1）WHO精子形態(tài)學(xué)分類標(biāo)準(zhǔn)  正常精子：頭部橢圓形（大小正常，長寬之比1.50—1.75，頂體界限清晰，頂體占頭部的40—70%），頭、頸、中段和尾部都正常。

（2）缺陷精子分類如下：

精子多重缺陷指標(biāo)的計算：①多重異常指數(shù)（the multiple anomalies index, MAI）：每個異常精子出現(xiàn)缺陷數(shù)的平均值，所有的頭部、頸部和尾部的畸形都計算在內(nèi)。②畸形精子指數(shù)（teratozoospermia index，TZI）：TZI與MAI相似，二者的區(qū)別在于TZI只記錄每個精子的四種缺陷：頭部、頸部、尾部及是否含有過大的殘留胞漿小滴，而非每個異常精子的實際缺陷數(shù)量。③精子畸形指數(shù)(sperm deformity index，SDI)：缺陷的數(shù)目除以總精子數(shù)（而非只是異常精子數(shù)）。該指數(shù)可記錄多種精子頭部異常的情況，但頸部和尾部的缺陷僅作一次記錄。

精子多重缺陷指標(biāo)的計算方法舉例如下：

（3）世界衛(wèi)生組織（WHO）推薦正常參考值：正常形態(tài)精子﹥4%

【注意事項】

1、精子洗滌不充分將會影響顯微鏡觀察。

2、受試者應(yīng)按照WHO技術(shù)規(guī)范采集精液標(biāo)本。

3、冬季染色時，如環(huán)境溫度較低，染色液A、染色液C的染色時間可適當(dāng)延長。

4、受檢者所有樣品均應(yīng)視為潛在的傳染源，檢測完畢的樣本、試劑、用具均須做為醫(yī)療廢物處理，避免污染環(huán)境。

5、精子染色試劑盒為體外診斷試劑，檢測結(jié)果僅供臨床參考，對患者的臨床管理應(yīng)結(jié)合其癥狀/體征、病史、其它實驗室檢查及治療反應(yīng)等情況結(jié)合考慮。

【基本信息】

產(chǎn)品注冊證號：閩明食藥監(jiān)械（準(zhǔn)）字2013第1400021號

執(zhí)行產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)：YZB/閩明0033-2013

醫(yī)療器械生產(chǎn)企業(yè)許可證號：閩食藥管械生產(chǎn)許第20110297號

包裝規(guī)格：30ml×6瓶/盒、100ml×3瓶/盒、250ml×3瓶/盒、500ml×3瓶/盒

存儲條件及有效期：試劑盒于4-28℃避光保存，有效期12個月。

【附錄】

影響精子受精或男性不育的因素

1.精子死亡率過高

2.精子畸形率過高

3.精子成熟率過低

4.精子染色體異常

5.精子數(shù)量過少

6.精子活動力過低

7.精子液化能力過低

三明市和眾生物技術(shù)有限公司——生殖醫(yī)學(xué)檢測試劑盒系列

1、精子DNA檢測試劑盒

2、精子DNA碎片檢測試劑盒

3、精子活性檢測試劑盒

4、精子形態(tài)學(xué)檢測試劑盒

5、精子核蛋白檢測試劑盒

五項聯(lián)合檢測，診斷分析精子的受精及生育能力，無須儀器，簡單、快速、準(zhǔn)確，不孕_不育科的*診斷方案。