細(xì)胞核擠壓測定系統(tǒng)-控制核膜破裂-Microchannels dish

細(xì)胞核擠壓測定
控制核膜破裂

讀出

核膜破裂，核膜重新密封，核變形，基因表達(dá)等

標(biāo)準(zhǔn)文化限制
在標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)物中，細(xì)胞遷移在生理和病理狀況中均起關(guān)鍵作用。在這些類型的過程中，細(xì)胞體和細(xì)胞核都受到嚴(yán)格的限制條件，因?yàn)樗鼈冃枰m應(yīng)環(huán)境所施加的外部幾何約束。但是，在保持成像和跟蹤細(xì)胞的能力的同時(shí)，要在3D矩陣中重現(xiàn)和控制這種復(fù)雜條件存在巨大困難。

細(xì)胞核擠壓試驗(yàn)
當(dāng)在微通道中培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)，可以跟蹤細(xì)胞行為，并可以獲取高分辨率圖像。

例子
細(xì)胞遷移過程中的核變形會導(dǎo)致核膜的暫時(shí)打開[1]

ESCRT III復(fù)合物（類似于有絲分裂出口處的情況）是快速重新密封核質(zhì)屏障的必需條件。
短暫的開放導(dǎo)致核質(zhì)混合（可能導(dǎo)致DNA損傷）。
這些事件助長了遺傳疾?。ㄈ缱蛋宀。?，還有助于解釋免疫細(xì)胞和癌細(xì)胞的遷移能力。

微通道上的HeLa細(xì)胞
HeLa細(xì)胞通過縮窄遷移過程中核質(zhì)屏障的開放

參考
[1] Raab，M.等。 （2016）?？茖W(xué)，352（6283），359-362。

技術(shù)
  該設(shè)備包含一組具有可變尺寸的模制微通道，細(xì)胞可以在其中遷移。

啟用趨化性（沿微流體通道生成的梯度）

沿其長度可變寬度的通道（模仿自然收縮）

通道設(shè)計(jì)，實(shí)現(xiàn)單元間交互

適應(yīng)任何細(xì)胞培養(yǎng)底物（從培養(yǎng)皿到96孔板）

與高分辨率光學(xué)顯微鏡系統(tǒng)兼容

材質(zhì)：PDMS或Flexdym

應(yīng)用領(lǐng)域：
 

細(xì)胞遷移，趨化性，細(xì)胞間相互作用，核力學(xué)，外滲能力等

微通道圖

（人類CD8 T淋巴細(xì)胞在收縮微通道上）圖片由Pablo Vargas提供（居里研究所（Institut Curie），UMR144）
和Fernando Sepulveda（Institut Imagine，UMR1163）

探索應(yīng)用示例

>癌癥分析中的細(xì)胞遷移：轉(zhuǎn)移過程中的細(xì)胞行為分析

>細(xì)胞核擠壓試驗(yàn)：控制核膜破裂

>趨化性測定：在狹窄空間中分析細(xì)胞行為和細(xì)胞遷移

>外泌體測定：模擬納米囊泡的制備

>定量細(xì)胞遷移測定：細(xì)胞遷移特性的快速，精細(xì)分析