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裸鼠成瘤模型科研實驗技術服務介紹
閱讀:39 發(fā)布時間:2024-9-24應用簡介
裸鼠皮下荷瘤是指將人源或鼠源細胞注射到免疫缺陷的裸鼠皮下,通過施加藥物或其它條件來驗證細胞成瘤或轉移能力的實驗方法。裸鼠腫瘤模型是研究腫瘤學、免疫學、藥品與生物制品的安全性評價以及有效性篩選等研究課題的基礎。
裸鼠皮下成瘤模型
裸鼠是具有一定免疫缺陷的小鼠,利用這一特點可以將腫瘤細胞移植到裸鼠皮下或體內,腫瘤細胞可以吸收裸鼠自身的營養(yǎng)進行生長或轉移而不會被小鼠免疫細胞殺傷,利用這一特點可以研究腫瘤細胞在有機體內成瘤能力、藥物對腫瘤細胞殺傷能力等問題。
實驗方法
技術總結
在裸鼠荷瘤實驗操作中有幾點需要特別注意:
▲細胞狀態(tài)對成瘤影響很大,在計劃做荷瘤實驗時務必確保細胞處于一個較好的狀態(tài),一般注射細胞數(shù)目不少于1*106個。
▲雖然裸鼠具有一定的免疫缺陷,但并不等于wan全沒有排異反應,一般選擇年齡不超過7周齡的裸鼠進行實驗,年齡太大可能會影響成瘤效果。
▲注射位點的選擇也有一定技巧性,一般選擇裸鼠腋下位置注射是因為這個位置血流豐富,易于短時間成瘤。
問題解答
▲瘤子長不出來是怎么回事?
一方面可能是細胞狀態(tài)差,活力不好,或是腫瘤細胞不易成瘤,需加入Matrigel輔助或增大接種量或更換細胞系;一方面可能是小鼠周齡太大,或小鼠免疫排斥,建議更換免疫缺陷程度更大的小鼠(Nod-scid小鼠,NOG小鼠>Nude裸鼠)
▲小鼠瘤子長起來又消失?
腫瘤塊先縮小,后變大很常見,很可能是炎癥反應,腫瘤細胞被小鼠自身吸收,繼續(xù)觀察腫瘤細胞吸收之后是否經過幾周還能長出來,長不起來建議換鼠。
▲均一性很差,腫瘤體積差距較大?
如果荷瘤分組發(fā)現(xiàn)小鼠腫瘤體積差距很大,這可能跟小鼠周齡及接種細胞量不一致導致,建議重新做實驗分組。
▲是否可以在一只小鼠進行多個點荷瘤?
不可以,一只老鼠就只能接種一個點。因為一個老鼠身上有多個腫瘤塊的情況下,可能會相互影響。
▲是否應用免疫抑制劑加速腫瘤生長
如果裸鼠荷瘤不生長,可以參考文獻,用免疫抑制劑如環(huán)磷酰胺(抑制裸鼠NK細胞活性)促進生長;不過最好不要為了縮短造模周期來加速生長,因為可能會造成潰爛,這樣就不得不中止實驗。所以一般情況下,應盡量符合細胞系本身的生長特性,不應過多地人為的干擾。