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Elisa實(shí)驗(yàn)稀釋問題解析方案
閱讀:836 發(fā)布時(shí)間:2015-7-21本月初時(shí),南京中醫(yī)藥大學(xué)的張老師第二次購買了我司進(jìn)口人Elisa試劑盒產(chǎn)品,上次實(shí)驗(yàn)在上海恒遠(yuǎn)生物公司技術(shù)員的指導(dǎo)下順利完成,張老師對我司產(chǎn)品與服務(wù)都非常滿意。而本次實(shí)驗(yàn)中,張老師遇到了一些問題,到何咨詢。
張老師說:“我在網(wǎng)上看到一些帖子說是通過抗原濃度,抗體的稀釋倍數(shù),設(shè)立梯度來確定效果,可是我想問測的的結(jié)果怎么看哪個(gè)效果好呢?看了一篇文獻(xiàn)他是說OD450值為1左右條件作為*條件,很是不解啊,我做的雙抗夾心法。"
聽完張老師的問題描述后,何立即將問題轉(zhuǎn)至技術(shù)部。二十分鐘后,技術(shù)員將問題解析方案整理出:這個(gè)確實(shí)有好幾種因素來確定,雙抗夾心的話,有包被抗體的濃度、緩沖液的選擇、孵育時(shí)間等好幾種因素,您要測試*的效果,就要控制變量的方法來確定。
一般來說,如果您是夾心法的話主要要用棋盤法確定一抗和抗原的濃度,二抗一般不需要怎么摸條件,您選一到兩個(gè)說明書上推薦的濃度即可。棋盤法中選OD值在1左右的一抗?jié)舛龋?此時(shí),應(yīng)該有多個(gè)1對應(yīng)的濃度)您要選一個(gè)在這個(gè)濃度下,測抗原的線性拉得zui寬的那一個(gè)。如果一抗?jié)舛忍?,想要測的抗原基本都可被吸附,這樣就達(dá)不到靈敏檢測的目的;如果一抗?jié)舛忍?,OD值比1小太多又會(huì)增大誤差。另外,抗體稀釋液一般就是在洗滌液中加入一定濃度的不相關(guān)蛋白。這樣可以減小非特異吸附(吐溫和蛋白均有此作用),直接用PBS的話可能會(huì)造成陰性O(shè)D過高
問題解決后,張老師非常滿意,并表示下學(xué)期有新的實(shí)驗(yàn)課題要做,還會(huì)繼續(xù)來買。非常感謝南京中醫(yī)藥大學(xué)張老師對上海恒遠(yuǎn)生物公司的鼎力支持與認(rèn)可!我們會(huì)竭誠為每一位客戶提供的產(chǎn)品與服務(wù)。