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Graves 病患者外周血淋巴細(xì)胞 NF-κB p65 活性與血清丙二醛水平升高

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摘 要 目 的 ： 探 討 Graves （GD） 病 患 者 血 清 丙 二 醛 （MDA） 水 平 及 NF-κB p65 亞 基 活 性 ， 了 解 其 免疫、氧化應(yīng)激狀態(tài) 。 方法：納入 GD 患者（患者組）90 例與健康對照（對照組）82 例，放射免疫方法檢測其血 清 FT3 、FT4、TSH 及 酶 聯(lián) 免 疫 吸 附 法 （ELISA）測 定 MDA 水 平 及 淋 巴 細(xì) 胞 NF-κB p65 活 性 。 應(yīng) 用 SPSS13．0 統(tǒng) 計 軟 件 進(jìn) 行 數(shù) 據(jù) 處 理 ，t 檢 驗 分 析 患 者 組 與 對 照 組 血 清 FT3 、FT4、TSH、MDA 水 平 及 淋 巴 細(xì) 胞 NF-κB P65 活性，pearson 相關(guān)分析它們之間的相關(guān)性。結(jié)果：對照組與患者組血清 FT3、FT4、TSH 水平差異有顯著性，P值均小于 0．001；兩組間血清 MDA 水平比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義，t ＝ －19．91，P ＝ 0．000；兩組間淋巴細(xì)胞 NF-κB p65 活性比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義，t ＝ －19．84，P ＝ 0．000。 患者組血清 MDA 水平與血清 FT3、淋巴細(xì)胞 NF-κB p65 活性正相關(guān)（r 值分別為 0．354、0．661，P 值分別為 0．001、0．000），與 TSH 負(fù)相關(guān)（r ＝ －0．261，P ＝ 0．013 ） ，與 FT4 不 具 有 統(tǒng) 計 學(xué) 意 義 的 相 關(guān) （r ＝ 0．104 ，P ＝ 0．329 ） 。 NF -κB p65 活 性 與 FT3 正 相 關(guān)（r ＝ 0．287，P ＝ 0．006）；與 FT4 和 TSH 無 統(tǒng) 計 學(xué) 意 義 的 相 關(guān) 性 。 結(jié) 論 ：GD 患 者 外 周 血 淋 巴 細(xì) 胞 NF-κB活 性 及 血 清 MDA 水 平 增 高 ，與 GD 嚴(yán) 重 程 度 相 關(guān) ，減 少 氧 化 應(yīng) 激 與 免 疫 損 傷 應(yīng) 成 為 GD 治 療 過 程 中 考慮的重要因素。

關(guān)鍵詞 Graves ??； 氧化應(yīng)激； 免疫損傷； 丙二醛； 核轉(zhuǎn)錄因子

彌漫性毒性甲狀腺腫 （Graves disease，GD）是內(nèi)分泌疾病甲狀腺功能亢進(jìn)癥 （甲 亢 ）的 主 要臨 床 類 型 之 一 。 多項研究提示患者外周血中甲狀 腺 相 關(guān) 抗 體、多種免疫球蛋白及多種細(xì)胞因子水 平 異 常 ［1 －2 ］，因此被認(rèn)為是一種自身免疫性疾病。

真核生物中的核轉(zhuǎn)錄因子 NF-κB，是 由 復(fù) 雜的多肽亞單位組成的蛋白家族，作為信號傳導(dǎo)途徑 中 的 樞 紐，參與多種生物過程 ，對 氧 化 應(yīng) 激 較為 敏 感，可以引起一系列細(xì)胞因子轉(zhuǎn)錄改變級聯(lián)反 應(yīng)。 GD 患者存在甲狀腺濾泡破壞 ，使 甲 狀 腺素 異 常 釋 放，這一過程中也可能產(chǎn)生氧化應(yīng)激損傷［3］，激 活 由 NF-κB 介導(dǎo)的細(xì)胞損傷［4 ］。 丙 二 醛（malonaldehyde，MDA） 可反映體內(nèi)脂質(zhì)過氧化 程度，間接反映細(xì)胞損傷程度，是氧化應(yīng)激損中的重要因子。本研究通過檢測 GD 患者外周血淋巴細(xì)胞NF-κB 活 性 及 血 清 MDA 水 平， 分 析 二 者 變 化 關(guān)系， 了解免疫調(diào)節(jié)異常及氧化應(yīng)激損傷在該病中的作用。

1 對象與方法

1．1 研究對象 患者組來自 2005 年 2 月至 2009年 2 月在甲狀腺疾病門診*就診的 GD 患者 90例，符合 ICD-10 GD 患者診斷標(biāo)準(zhǔn)，具有典型的甲亢癥狀：怕熱，多汗，納差，消瘦，心悸等，血清 FT3、FT4 升高，TSH 降低；甲狀腺攝碘率高，核素掃描攝锝明顯增強。 甲狀腺彩超呈“火海征”；病程不超過2 年，其中男 31 例，女 59 例，年齡 25 ～ 40 歲，平均（31．7 ± 4．38）歲；病程 0．5 ～ 7 個 月，中 位 數(shù) 1．4 個月，平均（1．7 ± 1．31）個月。 對照組 82 例來自健康體 檢 人 群，與患者年齡匹配，其 中 男 30 例，女 52例，年齡 25 ～ 40 歲，平均（31．7 ± 4．46）歲。 以上受檢者均排除骨關(guān)節(jié)疾病、 其他內(nèi)分泌代謝疾病以及肝腎功能不全者， 排除妊娠或服用某些影響甲狀腺功能藥物者。獨立樣本 t 檢驗分析甲亢組與對照組間年齡比 較：t ＝ －0．109，P ＝ 0．913； 性 別 構(gòu) 成 χ2 檢 驗 比較：χ2 ＝ 0．086，P ＝ 0．769。所有病例與對照均經(jīng)過河南省倫理委員會的批準(zhǔn)并簽署正式書面知情同意書。

1．2 研究方法

1．2．1 標(biāo) 本 準(zhǔn) 備 均于晨起空腹采肘靜脈血 5mL，3 mL 普通管，以 2 000 r ／ min 離 心 2 min，取 上層血清－80 ℃低溫保存，統(tǒng)一測定 FT3、FT4、TSH 和MDA；2 mL EDTA 抗凝，以 2 000 r ／ min 離 心 5 min用于分離淋巴細(xì)胞，測定 NF-κB P65 活性。

1．2．2 FT3、FT4、TSH 測 定 采 用 放 射 免 疫 法，應(yīng)用 γ 計數(shù)儀（國營二六二廠，PS2008）測定 FT3、FT4和 TSH，F(xiàn)T3 試劑盒靈敏度為 0．1 p mol ／ L，特異性：抗 T3 血 清 與 T4、rT3、T1、T2 交 叉 反 應(yīng) 率 均 ＜ 0．001，平均批內(nèi)變異度 （CV） ＜ 10％， 平 均 批 間 CV ＜15％；FT4 試 劑 盒：靈 敏 度 為 0．58 pmol ／ L，特 異 性：抗 T4 血 清 與 T3、rT3、T4、T2，水 溶 酸 鈉、阿 斯 匹 林 交叉反應(yīng) 率 均 ＜ 1 × 10－4，平 均 批 內(nèi) CV ＜ 10％，平 均批間 CV ＜ 15％； TSH 試劑盒：靈敏度為 0．1 mIU ／ L，平均批內(nèi) CV ＜ 8．7％，平均批間 CV ＜ 10．9％。

1．2．3 MDA 測定 應(yīng)用人 MDA 酶聯(lián)免疫吸附法（enzyme-linked immunosorbnent assay， ELISA）快 速檢 測 試 劑 盒 （購自上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司，MDA2003）測 定 血 清 MDA 水 平，依據(jù)試劑盒說明書進(jìn)行操作。

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