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lipo2000轉(zhuǎn)染試劑使用問題解答
閱讀:453 發(fā)布時(shí)間:2015-6-17提 供 商 | 上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司 | 資料大小 | 14KB |
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資料類型 | WORD 文檔 | 瀏覽次數(shù) | 453次 |
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lipo2000是各大實(shí)驗(yàn)室,科學(xué)院,技術(shù)實(shí)驗(yàn)室zui常用的轉(zhuǎn)染試劑,小小的試劑,價(jià)格不菲,經(jīng)常聽到客戶說嚴(yán)格按照說明書來操作,還會(huì)出現(xiàn)這樣或者那樣的問題??蛻艚?jīng)常抱怨東西貴,還做不出好效果。
1. Lipo2000的保存:4℃保存和運(yùn)輸
2. Lipo2000的活性:由于Lipo2000是生物蛋白,在4℃保存和運(yùn)輸,所以就算是同
一個(gè)批號(hào)的Lipo2000,只有在剛出廠分裝時(shí)活性才是相同的。經(jīng)過供應(yīng)商的保存、
運(yùn)輸(運(yùn)輸?shù)臏囟瓤刂聘鞑幌嗤?,其活性將有?xì)微的變化。
3. Lipo2000的優(yōu)化:
3.1 由于每一管Lipo2000的活性都不太相同,其實(shí)就算是同一管,使用的時(shí)間長(zhǎng)了,后期的活性跟剛開始用時(shí)也不太一樣,所以在拿到一管新的Lipo2000時(shí),一定要做一下活性優(yōu)化;
3.3 如果一直使用Lipo2000做實(shí)驗(yàn),優(yōu)化的步驟可以簡(jiǎn)化:
假設(shè)之前轉(zhuǎn)化時(shí)每孔一直用4ul Lipo2000,那么優(yōu)化的步驟可以簡(jiǎn)化為只用5個(gè)孔,每個(gè)孔中Lipo2000用量分別為3ul, 3.5ul, 4ul, 4.5ul, 5ul,其他條件不變,看那個(gè)Lipo2000的用量結(jié)果,接下來的實(shí)驗(yàn)就用優(yōu)化的用量。
4. Lipo2000的使用:
4.1 使用前將整管的Lipo2000混勻,分裝,分成100ul/管;
4.2 實(shí)驗(yàn)前,將分裝好的100ul Lipo2000和質(zhì)粒DNA(或RNA)放到實(shí)驗(yàn)臺(tái)上室溫平衡,不需要冰上保存;
4.3 將Opti-MEM培養(yǎng)基放到水浴鍋中37℃平衡;
4.4 按照說明書進(jìn)行轉(zhuǎn)染,注意控制好每一步操作的時(shí)間。
5. 切記并不是Lipo2000的用量越多越好,實(shí)際上,Lipo2000加多了,毒性會(huì)增加,細(xì)胞會(huì)死亡,轉(zhuǎn)化效率會(huì)大幅降低。