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做細(xì)胞培養(yǎng)實驗經(jīng)常會用到血清，血清用不完我們會凍起來下次使用。但相信大家也會發(fā)現(xiàn)在融化血清過程中會出現(xiàn)白色的沉淀物質(zhì)，就會疑惑這種情況是否是血清出現(xiàn)問題。

??首先呢我們要搞清楚血清中絮狀沉淀物是什么，沉淀物包含纖維蛋白和脂蛋白，這是正常特性，不會影響產(chǎn)品性質(zhì)。要除去沉淀，離心血清（400g，1~2分鐘）或簡單的讓其沉淀在瓶子底部，將血清小心的轉(zhuǎn)移到另一個無菌瓶里（一般不建議采用過濾的方法除去沉淀，因為沉淀會堵塞濾膜而無法過濾）。大多情況輕輕搖動沉淀并加熱至37℃就會再溶解。所以，使用產(chǎn)品時要搖動并加熱血清至37℃，沉淀會自然消失。

 

（1）怎樣才能降低沉淀物的發(fā)生呢？

 

1. 解凍血清/分裝凍存時，須規(guī)則搖晃均勻，使溫度及成分均一，減少沉淀的發(fā)生。

 

2. 勿將血清置于37℃太久，否則血清會變得渾濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定的成份也會因此受到破壞，從而影響血清的品質(zhì)。

 

3. 血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要無須做此步驟。

 

（2）使用時常見問題及解決方法：

 

一、保存血清最-好的方法

 

??血清應(yīng)保存在-5℃至-2O℃，若存放于4℃請勿超過一個月。若無法一次用完一瓶，建議將無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi)，再放回冷凍。

 

二、如何解凍血清不會使產(chǎn)品質(zhì)量受損

 

??將血清從冷凍箱取出后，先置于2-8℃冰箱使之溶解，然后在室溫下使之全溶。但必須注意的是，溶解過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。

 

三、避免沉淀物的產(chǎn)生

 

1. 解凍血清時，請按照所建議的逐步解凍法(-2O℃至4℃至室溫)，若血清解凍時改變的溫度太大(如-20℃至37℃)，實驗顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。

 

2. 解凍血清時，請隨時將之搖晃均勻，使溫度及成分均一，減少沉淀的發(fā)生

 

3. 請勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會因此受到損害，而影響血清的質(zhì)量。

 

4. 血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要無須做此步驟。

 

5. 若必須做血清的熱滅活，請遵守56℃，30分鐘的原則，并隨時搖晃均勻。溫度過高，時間過久或搖晃不均勻，都會造成沉淀物的增多。

 

四、如何處理血清解凍后有絮狀沉淀物出現(xiàn)

 

??想要去除這些絮狀沉淀物，可將血清分裝至無菌離心管內(nèi)，以400g稍微離心，上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾。但不建議以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物，因為它可能會阻塞過濾膜。

 

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