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小鼠磷酸二酯酶(PDE)酶聯(lián)免疫試劑盒原理

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更新時間:2022-08-30 09:09:44瀏覽次數(shù):989

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 兩周    
小鼠磷酸二酯酶(PDE)酶聯(lián)免疫試劑盒原理用于體外定量檢測血清、血漿、組織、細(xì)胞上清及相關(guān)液體樣本中小鼠磷酸二酯酶(PDE)的含量。

詳細(xì)介紹

小鼠磷酸二酯酶(PDE)酶聯(lián)免疫試劑盒原理

l 本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織、細(xì)胞上清及相關(guān)液體樣本中小鼠磷酸二酯酶(PDE)的含量。

l 有效期:6個月

l 保存條件:2-8℃

l 本試劑盒僅供體外研究使用,不用于臨床診斷

 

實驗原理

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預(yù)先包被小鼠磷酸二酯酶(PDE)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠磷酸二酯酶(PDE)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。

小鼠磷酸二酯酶(PDE)酶聯(lián)免疫試劑盒原理操作步驟:

大部分ELISA 檢測均以血清為標(biāo)本。血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集,應(yīng)注意避免溶血,紅細(xì)胞溶解時會釋放出具有過氧化物酶活性的物質(zhì),以HRP 為標(biāo)記的ELISA 測定中,溶血標(biāo)本可能會增加非特異性顯色。血清標(biāo)本宜在新鮮時檢測如有細(xì)菌污染,菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,也會產(chǎn)生假陽性反應(yīng)。一般說來,在5 天內(nèi)測定的血清標(biāo)本可放置于4℃,標(biāo)本在冰箱中保存時間過長導(dǎo)致血清IgG 聚合,使間接法的試劑本底加深。超過一周測定的需-20℃保存。凍結(jié)血清融解后,蛋白質(zhì)局部濃縮,分布不均,應(yīng)充分混勻并避免產(chǎn)生氣泡。混濁或有沉淀的血清標(biāo)本應(yīng)先離心或過濾,澄清后再檢測。反復(fù)凍融會使抗體效價跌落,所以測抗體的血清標(biāo)本如需保存作多次檢測,宜少量分裝冰存。保存血清自采集時就應(yīng)注意無菌操作,也可加入適當(dāng)防腐劑。

抗凝不*的標(biāo)本因纖維蛋白原的干擾而造成假陽性,建議盡量不用抗凝血尤其是肝素抗凝劑。

1.血清標(biāo)本如是以無菌操作分離,則可以在2~8℃下保存一周,如為有菌操作,則建議冰凍保存。樣本的長時間保存,應(yīng)在-70℃以下。

2.在使用微量加樣器時,吸取不同瓶子中液體后要更換槍頭,即使吸取標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

3.吸取液體時速度不易太快,以免產(chǎn)生氣泡,吸取的量不夠準(zhǔn)確。

4.樣本的采集及血清分離中要注意盡量避免細(xì)菌污染,一則細(xì)菌的生長,其所分泌的一些酶可能會對抗原抗體等蛋白產(chǎn)生分解作用;二則一些細(xì)菌的內(nèi)源性酶,如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶本身會對用相應(yīng)酶作標(biāo)記的測定方法產(chǎn)生非特異性干擾。1.5 吸取液體時要選用量程和需要量接近的微量加樣器吸,減少誤差。

5.液體全部加入酶標(biāo)孔后,將酶標(biāo)板放在桌子上平行輕輕搖晃30s,使液體充分混合均勻,也使其得到充分的反應(yīng)。

6.孵育時要使蓋板膜封好酶標(biāo)板,防止水分蒸發(fā),以防曲線不成線性。

7.實驗前30min將試劑盒中的所有試劑從冰箱取出,使試劑盒中的所有試劑與提取好的樣品溶液的溫度相同,酶標(biāo)板只要取出所需量。

8.由于底物顯色劑對光及其敏感,因此要避光保存。

要注意避免出現(xiàn)嚴(yán)重溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團,其有類似過氧化物的活性,因此,在以HRP為標(biāo)記酶的ELISA測定中,如血清標(biāo)本中血紅蛋白濃度較高,則其就很容易在溫育過程中吸附于固相,從而與后面加入的HRP底物反應(yīng)顯色

9.手工洗板時每次加入洗滌液后。應(yīng)靜置15~30s,不要將一個酶標(biāo)孑L中的洗滌液濺入另一酶標(biāo)孔中,防止交叉污染。甩去洗滌液后將酶標(biāo)板放在毛巾或吸水紙上拍干。

10.檢測吸光度前應(yīng)將酶標(biāo)儀打開,將其預(yù)熱30min以上。

11.底物為TMB,避免與皮膚相接觸。終止液為2tool的濃硫酸具有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸皮膚。

12.孵育的時間應(yīng)該嚴(yán)格按照試劑盒說明書上的時間為準(zhǔn)。

13.要盡量做雙孔實驗,這樣才既能保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性,又能反映出試劑盒的精密度。

14.冰凍保存的血清標(biāo)本須注意避免因停電等造成的反復(fù)凍融。標(biāo)本的反復(fù)凍融所產(chǎn)生的機械剪切力將對標(biāo)本中的蛋白等分子產(chǎn)生破壞作用,從而引起假陰性結(jié)果。此外,凍融標(biāo)本的混勻亦應(yīng)注意,不要進行劇烈振蕩,反復(fù)顛倒混勻即可。

15.對樣本的結(jié)果有疑問時需要使用其他檢測方法進行驗證。

16.沒有去離子水或雙蒸水時,可以使用娃哈哈純凈水配制溶液,切勿使用自來水。

17.標(biāo)本在保存中如出現(xiàn)細(xì)菌污染所致的混濁或絮狀物時,應(yīng)離心沉淀后取上清檢測。

代測相關(guān)信息

 一、代測范圍

1、本公司公布的試劑盒,可以提供代測服務(wù)。

2、本公司上尚未列出的試劑盒,可以代為研發(fā)和測定,費用等相關(guān)信息咨詢。  

二、公司責(zé)任

1、對于客戶提供的樣品和要測定的指標(biāo),及時提供規(guī)范的檢測報告,確保數(shù)據(jù)真實可靠。未經(jīng)客戶允許,不得相關(guān)信息透露給第三方。

2、對于公司上列出的試劑盒測定指標(biāo),我們將在收到樣品之日起13個工作日內(nèi)提供規(guī)范的檢測報告;反之,提供檢測報告的時間由雙方協(xié)商決定。

3、本公司的檢測報告僅對收到的樣品負(fù)責(zé)。為了確保測定結(jié)果有效,請客戶在送檢前與本公司客服人員溝通,并且按照要求做好樣品的數(shù)量、標(biāo)簽和寄送等相關(guān)事宜。

4、客戶如果對測定結(jié)果不滿意,務(wù)必在收到檢測報告之日起起5個工作日內(nèi)與本公司客服人員,商定解決辦法。

5、在收到客戶檢測費起5個工作日內(nèi)快遞寄送加蓋公章的紙質(zhì)檢測報告和發(fā)票。

 三、客戶責(zé)任

 1、提供樣品的性質(zhì)(物種和組織等)和處理狀況(有無特殊的化學(xué)處理等),確保樣品數(shù)量和標(biāo)簽無誤,以符合要求的方式進行包裝和寄送(注意加足夠的冰袋冷藏,特別嬌貴的樣品請用干冰)。

2、及時付款。一般在寄送樣品時付費用的70%,收到電子版檢測報告,確認(rèn)無誤后付剩下的30%。如有特殊情況需雙方協(xié)商決定。

3、以上單個樣品測定價格包括預(yù)測費用、試劑費用、人工費用和數(shù)據(jù)處理費用以及蛋白質(zhì)含量測定費用。由于統(tǒng)計處理需要,一般處理每個樣品應(yīng)該至少測定三次(強烈建議)。如果樣品中已經(jīng)包括三次或三次以上重復(fù),或者用戶不需要重復(fù)測定,請用戶聲明。如果測定樣品數(shù)量很多,可以在測定的總費用上進行適當(dāng)?shù)臏p免。 四、代測的優(yōu)勢

 1、將要測定的樣品都是有研發(fā)該試劑盒的專家全權(quán)負(fù)責(zé)的,因此可以確保測定結(jié)果的準(zhǔn)確性。

2、節(jié)省客戶的寶貴時間和精力。

 3、交給我們代測,您可以不必為操作經(jīng)驗的不成熟和儀器的缺乏而苦惱。

五、附加免費服務(wù)

 1、根據(jù)客戶研究目的,免費提供專業(yè)的檢測意見和建議。

2、免費提供樣品蛋白質(zhì)含量測定。

3、免費提供測定結(jié)果分析,包括顯著性差異、指標(biāo)變化的生理生化意義和相關(guān)指標(biāo)變化之間的關(guān)系等。

為何選擇本公司“”?

我司是一家專業(yè)從事“產(chǎn)品研發(fā)生產(chǎn)、市場銷售、技術(shù)服務(wù)”為一體的生物技術(shù)公司,公司生產(chǎn)的產(chǎn)品質(zhì)量有保證,含量高,能夠給實驗帶來準(zhǔn)確的結(jié)果。同時試劑隨貨附帶質(zhì)檢報告和圖譜,能為用戶更好的解決各種疑難問題。如有需要可我司銷售人員,我們將竭誠為您服務(wù)。

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