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實(shí)驗(yàn)室研究人血清IGE檢測方法
閱讀:1685 發(fā)布時(shí)間:2014-9-18據(jù)夏說明,上海恒遠(yuǎn)實(shí)驗(yàn)技術(shù)部已研究出人血清IGE檢測方法,現(xiàn)發(fā)布分享給大家。了解更多的相關(guān)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容,或者有任何建議/意見都可以來電給我公司業(yè)務(wù)員咨詢,也可以在本留言。
IgE和IgG4(以下只用IgE代表)是介導(dǎo)Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)的抗體,因此檢測人血清總IgE和特異性IgE對Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)的診斷和過敏原的確定很有價(jià)值。
【總IgE的測定】
·測定方法
正常情況下血清IgE僅在ng/ml水平,用常規(guī)測定IgG或IgM的凝膠擴(kuò)散法檢測不出IgE,必須用高度敏感的放射免疫測定法及酶聯(lián)免疫測定法進(jìn)行檢測。
1. 放射免疫吸附劑試驗(yàn)是將抗IgE吸附到固相載體上用以檢測血清IgE的方法,故又稱固相放射免疫測定;臨床常用雙抗體夾心法,多以濾紙為載體。將抗IgE抗體偶聯(lián)到經(jīng)溴化氟活化的濾紙上,使其與待檢血清及IgE參考標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行反應(yīng);洗滌后加入125I標(biāo)記的抗人IgE,再經(jīng)洗滌后測定濾紙片的放射活性,其測定值與標(biāo)本中的IgE含量呈正相關(guān)。
2. 酶聯(lián)免疫測定法測定血清IgE時(shí)也常用雙抗體夾心ELISA法,操作方便,敏感性也很高,在臨床上經(jīng)常應(yīng)用。
3. 間接血凝試驗(yàn)用抗IgE至敏紅細(xì)胞,將標(biāo)本血清做系列稀釋后與致敏紅細(xì)胞反應(yīng)。此法更加簡便易行,便于普及,但敏感性比上兩法稍低。
【人血清特異性IgE的測定】
·測定方法
特異性IgE是指能與某種過敏原特異性結(jié)合的IgE,因此需要用純化的變應(yīng)原代替抗IgE進(jìn)行檢測;常用的方法仍然是放射免疫技術(shù)和酶標(biāo)免疫技術(shù)。
1. 放射變應(yīng)原吸附劑試驗(yàn)將純化的變應(yīng)原與固相載體結(jié)合,加入待檢血清及參考對照,再與同位素標(biāo)記的抗IgE抗體反應(yīng),然后測定固相的放射活性,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線求出待檢血清中特異性IgE的含量,或在標(biāo)本放射活性高于正常人均數(shù)加3S時(shí)判為陽性。
2. 酶聯(lián)免疫測定法試驗(yàn)原理及步驟基本同RAST,僅是zui后加入酶標(biāo)記的抗IgE,利用酶底物進(jìn)行顯色。測定結(jié)果的表示也與RAST相同。
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