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找亮點了!原來蛋白標準品可以這樣分
閱讀:2857 發(fā)布時間:2014-8-21找亮點了!原來蛋白標準品可以這樣分
·未預染的Marker即寬分子量蛋白標準、高分子量蛋白標準以及低分子量蛋白標準;
·預染的Marker即單色預染和多色預染。
【上海恒遠提示:此圖可移出放大】
在western Blot過程中,分子量Marker就像個螺絲釘一樣沒雖然是個小細節(jié),然而就是這樣一個小細節(jié)對實驗結(jié)果有著不可忽視的作用。這個Western Blot參照家族的一員的作用主要是用來指示蛋白條帶所對應的分子量大小,只有標準量無誤了,實驗結(jié)果才有說服力,除此之外,蛋白標準還有表示轉(zhuǎn)移成功或者蛋白在凝膠上的電泳程度等等的作用,所以選擇正確的蛋白Marker也是western blot實驗成功的必要條件之一。
Western的蛋白分子量標準
·生物素標記蛋白標準
·特殊標記蛋白標準
未染色(pre mixed)蛋白分子量標準
·寬分子量蛋白標準
·高分子量蛋白標準
·低分子量蛋白標準
預染蛋白標準可以分為兩種:① 單色預染,② 多色預染。
其實區(qū)別就在于幫助在實驗過程中辨認某個條帶的大小--Marker條帶越多參考價值越大,可就越難辨認區(qū)分,如果用不同的顏色來區(qū)別就比較好辨認了。如果沉悶的電泳實驗中跑出五顏六色的彩虹Marker,此時心情想必會愉快一些!單色的Marker通常是利用其中某些條帶加倍濃度來提示其大小的。還有一點特別要注意,由于轉(zhuǎn)膜是一個將膠里的Marker濃縮在潔白的膜上,所以需要的上樣量相對少一些,如果想要在電泳過程中看到美麗的“彩虹”,或者單色的Marker往往需要比說明書里多加一些Marker的。