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詳說免疫試劑的特異性|比例|敏感性

閱讀:1857          發(fā)布時間:2014-9-19

    今天是本周的zui后一個工作日了,在明后兩天中如果您有需要咨詢的產品價格及技術信息可在本中留言。今天上海恒遠為您詳說免疫試劑的特異性|比例|敏感性。
·特異性
    抗原抗體的結合實質上只發(fā)生在抗原的抗原決定簇與抗體的抗原結合位點之間。由于兩者在化學結構和空間構型上呈互補關系,所以抗原抗體反應具有高度的特異性??乖贵w反應的這種特異性使免疫測定能在一非常復雜的蛋白質化合物中測定某一特定的物質,而不需先分離待檢物。
    但是這種特異性也不是的。假使兩種化合物有著部分相同的結構,在抗原抗體反應中可出現交叉反應。用hCG免疫動物所得的抗血清中含有抗α-hCG和抗β-hCG兩種抗體,抗α-hCG抗體將與LH中的 
    α酶位發(fā)生交叉反應。在臨床檢驗中,如用抗hCG抗血清作為妊娠診斷試劑檢定尿液中hCG,只能用于hCG濃度較高的試驗,否則婦女生理性排泄入尿液中的微量LH將與之發(fā)生交叉反應。因此在作為早孕診斷(敏感度應達到50mIu/mlhCG)的實際中必須應用只對hCG特異的抗β-hCG,以避免與其它激素的交叉反應的發(fā)生。
    
·zui適比例
     在恒定量的抗體中加入遞增量的抗原形成抗體復合物的量。曲線的高峰部分是抗原抗體比例zui合適的范圍,稱為等價帶。在等價帶前后分別為抗體過剩帶和抗原過剩帶。如果抗原或抗體極度過剩,則無沉淀物形成,在免疫測定中稱為帶現象。抗體過量稱為前帶,抗原地過量稱為后帶。在用免疫學方法測定抗原時,應使反應系統(tǒng)中有足夠的抗體量,否則測得的量會小于實際含量,甚至出現假陰性。
    免疫試劑測定是一種很敏感的測定方法,抗原抗體反應后直接測定形成的沉淀或濁度,敏感度可達5~10μg/ml,但在臨床檢驗中,某些待測物在標本中的含量遠低于這一水平,因此要尋找增加敏感度的方法。標記的免疫測定是將檢測試劑中的抗原或抗體用可微量測定的物質加以標記,通過測定標記物來提高敏感度。在放射免疫測定和酶免疫測定中,標記物分別為放射性核素和酶,zui后用測定放射性和酶活力來計算待檢物的量,敏感度可比直接測定沉淀物提高數百至數千倍。在標記免疫測定中,一般加入過量的標記試劑以保證與待測物*反應。
·敏感性
    在測定血清中某一物質的含量時,化學比色法的敏感度為mg/ml水平,酶反應測定法的敏感度約為5~10μg/ml,免疫測定中凝膠擴散法和濁度法的敏感度與酶反應法相仿。標記的免疫測定的敏感度可提高數千倍,達ng/ml水平。例如,用放射免疫測定法或免疫試劑測定法測定HBsAg,其敏感度可達0.1ng/ml。
       

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