IgA的純化 血清中IgA的含量較低,一般從乳汁中提取分泌型IgA。 【材料和試劑】 (1)人初乳Xml。 (2)生理鹽水(NS),HCl。 (3)2mol/L Tris,0.1mol/L pH6.3 PB。 (4)0.01mol/L, pH7.5(含0.1mol/L NaCl)和0.01mol/L,pH7.7(含0.25mol/L NaCl)的PB。 【操作步驟】 (1)取Sephadex G-200 25g,經蒸餾水充分膨脹后,以0.01mol/L,pH6.3的PB平衡并裝柱,柱床體積為2.5cm×100cm。 (2)將10ml NS緩慢加入初乳中,混勻,43000r/min 4℃離心60min。 (1)吸出中層乳清液,以1mol/L HCl調至pH4.0,4℃ 24000r/min離心30min。 (2)吸取上清以2mol/L Tris 調至pH7.3,同上離心,取上清,以0.45μm硝酸纖維素膜過濾。 (3)收集濾出液過Sephadex G-200層析柱,以0.01mol/L,pH6.8 的PB低溫洗脫,0.3~0.5ml/min,分部收集,并以紫外監(jiān)測儀280nm監(jiān)測。 (4)*峰以IgM為主,第二峰為IgA,第三峰為IgG,收集合并第二峰各管,裝入透析袋中。 (5)對0.01mol/L,pH7.5(含0.1mol/L NaCl)的PB透析4~6h。 (6)過DEAE-Sephadex A-50柱,以0.01mol/L,pH7.5(含0.1mol/L NaCl)的PB洗脫至OD 280nm< 0.02。 (7)改用含0.25mol/L NaCl的PB洗脫,分部收集,280nm測蛋白峰,收集合并含蛋白的洗脫峰,濃縮后置-20℃保存。 我司多種*抗體展示: 純化抗體 | | 品名 | 包裝 | 羊抗人 IgG | 1mg | 羊抗人 IgG | 10mg | 羊抗人 IgG | 100mg | 羊抗小鼠 IgG | 1mg | 羊抗小鼠 IgG | 10mg | 羊抗小鼠 IgG | 100mg | 羊抗兔 IgG | 1mg | 羊抗兔 IgG | 10mg | 羊抗兔 IgG | 100mg | 羊抗人 IgM | 1mg | 羊抗人 IgM | 10mg | 羊抗人 IgM | 100mg | 羊抗人 IgA | 1mg | 羊抗人 IgA | 10mg | 羊抗人白蛋白 | 1mg | 羊抗人白蛋白 | 10mg | 羊抗人纖維蛋白原 | 1mg | 羊抗人纖維蛋白原 | 10mg | 兔抗羊 IgG | 1mg | 兔抗羊 IgG | 10mg | 兔抗豬 IgG | 1mg | |