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技術(shù)文章

抗原修復(fù)結(jié)果假陽(yáng)性太多技術(shù)分析

閱讀:2303          發(fā)布時(shí)間:2013-4-3

zui近實(shí)驗(yàn)經(jīng)常接收這樣的問(wèn)題,如抗原修復(fù)結(jié)果假陽(yáng)性太多,對(duì)此我司對(duì)以來(lái)客戶(hù)提出問(wèn)題作出答案。

問(wèn):做冰凍切片,由于固定時(shí)間較長(zhǎng),進(jìn)行70度30分鐘的抗原修復(fù)結(jié)果假陽(yáng)性太多,是否可以不進(jìn)行修復(fù)呢,一抗是否可以4度過(guò)夜呢,我用的是羅氏POD TUNEL

答1.  抗原修復(fù)的原因是標(biāo)本在甲醛等固定過(guò)程中,因發(fā)生蛋白交聯(lián)和甲醛的封閉作用使抗原性降低,可以通過(guò)抗原修復(fù)使抗原決定族充分暴露出來(lái)。
2.  免疫組化中經(jīng)常使用抗原修復(fù),因?yàn)樗脑碇饕强乖涂贵w反應(yīng),通過(guò)抗原修復(fù)使更多的抗原與抗體結(jié)合,避免假陰性結(jié)果。
3.  而TUNEL的原理是dUTP與斷裂的DNA上的3‘OH結(jié)合,故不需抗原修復(fù)。
4.  *次TUNEL反應(yīng)只需37度反應(yīng)1h,或者延長(zhǎng)時(shí)間即可。
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