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技術(shù)文章

酸化血清溶血試驗技術(shù)分析

閱讀:2723          發(fā)布時間:2013-4-1
實驗原理
  陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥(PNH)患者的紅細(xì)胞由于膜的缺陷,對補(bǔ)體的敏感性增加,這些對補(bǔ)體敏感的紅細(xì)胞能被正常血清 所溶解,特別在血清 酸性條件下(pH6.4-6.5)經(jīng)37℃孵育,溶血更明顯。

實驗方法
  材料:
  1.0.25mol/LHCL
  2.0.85%生理鹽水
  3.離心機(jī) 、試管 、水浴 箱等
  方法:
  1.取靜脈血2-3ml,取下針頭,將血輕輕注入試管 中;
  2.離心吸出血清備用;
  3.將血塊搗碎,用生理鹽水洗滌3次,配成50%紅細(xì)胞懸液備用;
  4.按下表進(jìn)行操作;

待測管(ml)
對照管(ml)
0.5
/
0.025
0.025
/
0.5
0.05
0.05

  5.兩管均加塞,置37℃水浴 箱中1h后直接觀察或者離心后觀察結(jié)果。
 
實驗結(jié)果計算
  溶血為陽性,不溶血為陰性

注意事項
  1.本實驗不用抗凝血,因抗凝劑會阻礙溶血,降低敏感性,出現(xiàn)假陰性;
  2.血清酸化后立即塞緊管口,以防二氧化碳逸出;
  3.血清需新鮮,以免補(bǔ)體失活,造成假陰性;
  4.實驗用具要干燥,針頭要粗,紅細(xì)胞懸液要直接滴入液體,不要沿管壁流下,以免溶血。

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