技術(shù)文章
酸化血清溶血試驗(yàn)技術(shù)分析
閱讀:2814 發(fā)布時間:2013-4-1實(shí)驗(yàn)原理
陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥(PNH)患者的紅細(xì)胞由于膜的缺陷,對補(bǔ)體的敏感性增加,這些對補(bǔ)體敏感的紅細(xì)胞能被正常血清 所溶解,特別在血清 酸性條件下(pH6.4-6.5)經(jīng)37℃孵育,溶血更明顯。
實(shí)驗(yàn)方法
材料:
1.0.25mol/LHCL
2.0.85%生理鹽水
3.離心機(jī) 、試管 、水浴 箱等
方法:
1.取靜脈血2-3ml,取下針頭,將血輕輕注入試管 中;
2.離心吸出血清備用;
3.將血塊搗碎,用生理鹽水洗滌3次,配成50%紅細(xì)胞懸液備用;
4.按下表進(jìn)行操作;
待測管(ml) | 對照管(ml) |
0.5 | / |
0.025 | 0.025 |
/ | 0.5 |
0.05 | 0.05 |
5.兩管均加塞,置37℃水浴 箱中1h后直接觀察或者離心后觀察結(jié)果。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算
溶血為陽性,不溶血為陰性
注意事項(xiàng)
1.本實(shí)驗(yàn)不用抗凝血,因抗凝劑會阻礙溶血,降低敏感性,出現(xiàn)假陰性;
2.血清酸化后立即塞緊管口,以防二氧化碳逸出;
3.血清需新鮮,以免補(bǔ)體失活,造成假陰性;
4.實(shí)驗(yàn)用具要干燥,針頭要粗,紅細(xì)胞懸液要直接滴入液體,不要沿管壁流下,以免溶血。
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