技術文章
恒遠分享植物血凝素的配置方法
閱讀:2339 發(fā)布時間:2012-12-25恒遠分享植物血凝素的配置方法
植物血凝素也稱為植物凝集素(PHA),可自制也可購自商品。自制的方法常用生理鹽水提取法。
(A)干品制備法
(1)選廣東雞子豆10g,用蒸餾水沖洗,置培養(yǎng)皿內(nèi)用75%酒精一次性浸洗,倒掉酒精留間隙置37℃。恒溫箱內(nèi)24-48小時;
(2)在無菌條件下研碎雞子豆,加生理鹽水30ml,搖勻后放入4℃冰箱24小時,第二天再加生理鹽水70ml,再置4℃冰箱內(nèi)24小時。每8-12小時搖蕩一次。(也可一次性加100ml生理鹽水);
(3)無菌條件下移入10-50ml離心管內(nèi),3000-4000rpm30分鐘。在無菌箱內(nèi)把上清液分裝于10ml小瓶,置冰箱冷凍層備用;(4)效價:外周血染色體制備每100ml培養(yǎng)基加PHA約2ml。注:若整個過程未在無菌條件下進行,分裝時用G5玻砂漏斗除菌即可。
(B)鮮品制備法:
(1)選擇完整無破皮鮮菜豆20g,用75%酒精浸泡10分鐘;
(2)在凈化工作中用無菌鹽水或蒸餾水漂洗二次,然后置無菌乳缽中搗成糊狀,用100ml無菌鹽水浸泡封口;
(3)移入4℃冰箱中置24小時,中間搖動數(shù)次,次日3000rpm30分鐘,在無菌情況下分裝上清液于10ml小瓶內(nèi),置冰箱冷凍層備用。
(4)效價:正式使用前先用一定量作效價測定,按效價使用。
上海恒遠生化試劑有限公司產(chǎn)品涵蓋免疫調(diào)節(jié)蛋白、白介素、集落刺激因子、生長因子、化學趨化因子、干擾素、脂聯(lián)素、成纖維生長因子、轉(zhuǎn)化生長因子、腫瘤壞死因子、神經(jīng)營養(yǎng)素和防御素等諸多生命科學研究領域中重要的生物活性分子。 為跟蹤當今科研發(fā)展、滿足日益增長的需求,上海恒遠研制出無動物成分的重組蛋白 。這些蛋白是利用專有的無動物成分生產(chǎn)設施,在嚴格的無動物成分條件下生產(chǎn)出來,因此痕量的動物源性污染引發(fā)潛在問題的可能性被降至zui低,從而*達到臨床前研究和細胞治療用標準。