在實(shí)驗(yàn)室環(huán)境中分析細(xì)胞時(shí),流式細(xì)胞儀是一種廣泛使用且全面的單細(xì)胞分析方法。本文詳細(xì)介紹了流式細(xì)胞儀及工作原理和系統(tǒng)組成。
什么是流式細(xì)胞儀?
流式細(xì)胞技術(shù)是一種用于分析細(xì)胞的具有多種應(yīng)用的技術(shù),包括細(xì)胞計(jì)數(shù)、表型分析、細(xì)胞周期評(píng)估和生存力檢測等不同應(yīng)用。流式細(xì)胞儀中激光產(chǎn)生的光被樣品中的細(xì)胞散射,由檢測器測量,然后轉(zhuǎn)換為可以分析和測量的信號(hào)。
流式細(xì)胞儀如何工作?
開始使用流式細(xì)胞儀,第一步是準(zhǔn)備要分析的樣品。從細(xì)胞培養(yǎng)物,血液或分解的組織中獲得的細(xì)胞應(yīng)制成懸浮液。將該細(xì)胞懸浮液分成數(shù)個(gè)試管進(jìn)行染色,保留未染色細(xì)胞作為對照。通過添加標(biāo)記有熒光探針的抗體或染色細(xì)胞成分的染料對其他細(xì)胞樣品染色。分析細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)時(shí),首先必須將細(xì)胞固定,使用福爾馬林緩沖液并進(jìn)行透化(使用透化劑),以使抗體和染料進(jìn)入細(xì)胞。細(xì)胞與抗體或染料孵育后,將細(xì)胞在緩沖液中洗滌,然后重懸在基于鹽的緩沖液中進(jìn)行分析。然后將準(zhǔn)備好的樣品引入流式細(xì)胞儀。
流式細(xì)胞儀組成部分有哪些?
三個(gè)主要組成部分:液流系統(tǒng),光學(xué)系統(tǒng)和電子系統(tǒng)。
在流式細(xì)胞儀的中心部分-流通池-樣品材料遇到激發(fā)光并散射光,隨后該光被檢測系統(tǒng)讀取和記錄。
流式細(xì)胞儀至少還應(yīng)包含一個(gè)激光器,一個(gè)檢測器和一個(gè)流控系統(tǒng),以確保細(xì)胞快速流過激光束。多年來,流式細(xì)胞儀中的激光器數(shù)量以及檢測器的數(shù)量和質(zhì)量已顯著增加。這些發(fā)展擴(kuò)大了可以立即檢測到的標(biāo)記的數(shù)量。
Navios系列為高通量實(shí)驗(yàn)室的先進(jìn)流式細(xì)胞儀應(yīng)用提供了一個(gè)解決方案。強(qiáng)大的性能意味著省心的操作,因?yàn)樵诜治鲋匾獦颖緯r(shí),每個(gè)細(xì)節(jié)都很重要。