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廣州健侖生物科技有限公司

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雞馬立克氏病病毒I型核酸檢測試劑盒

  • 發(fā)布日期:
  • 有效日期:
  • 所 在 地:
  • 產(chǎn)  地:
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  • 2024年11月7日
  • 2025年5月7日
  • 廣東廣州市
  • 廣州
  • 86次

【產(chǎn)品簡介】

雞馬立克氏病病毒I型核酸檢測試劑盒
(我司同時有登革熱,克錐蟲,絲蟲,非洲錐蟲,恙蟲,無形體,立次克體,基孔肯熱,寨卡病毒,黃熱病檢測試劑盒,各種質(zhì)控品,抗原,)


【詳細(xì)說明】

           雞馬立克氏病病毒I型核酸檢測試劑盒

(我司同時有登革熱,克錐蟲,絲蟲,非洲錐蟲,恙蟲,無形體,立次克體,基孔肯熱,寨卡病毒,黃熱病檢測試劑盒,各種質(zhì)控品,抗原,)

【產(chǎn)品名稱】

通用名稱:雞馬立克氏病病毒I型核酸檢測試劑盒

英文名稱:Detection Kit for Avian Influenza Virus Subtype H5 RNA (PCR-Fluorescence Probing)

【包裝規(guī)格】大包裝,24 反應(yīng)/盒;大包裝,48 反應(yīng)/盒

需自備的試劑:核酸提取試劑

質(zhì)控品說明:陽性質(zhì)控品為含目的片段的重組質(zhì)粒,使用時無需進行核酸提取。

【儲存條件及有效期】

試劑盒保存于-20±5℃,有效期 9 個月。

試劑盒在 37℃可保存72h;試劑在 4℃可保存7天;避免反復(fù)凍融,反復(fù)凍融次數(shù)不超過 7 次;試劑開瓶次數(shù)不超過 7 次。運輸采用干冰保持低溫,運輸時間不應(yīng)超過 3 天。試劑盒生產(chǎn)日期見產(chǎn)品標(biāo)簽。

【適用儀器】ABI 7500、ABI 7300、LightCycler480 等熒光定量 PCR 儀。

鴨瘟病毒核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)

【樣本要求】

新城疫病毒核酸檢測試劑盒

  1. 適用樣本類型:咽喉拭子、泄殖腔拭子、肌肉或臟器樣本等。
  2. 樣品采集與前處理(注意無菌操作)
  3. 活禽樣品——取咽喉拭子和泄殖腔拭子,或新鮮糞便拭子,具體采集方法如下:·咽喉拭子,采取時要將拭子深入喉頭及上腭裂來回刮3~5次,取咽喉分泌液;·取泄殖腔拭子時,將拭子深入泄殖腔轉(zhuǎn)一圈沾取糞便;對于易造成損傷的小珍禽,直接用拭子沾取適量新鮮糞便;·將咽喉拭子和泄殖腔拭子一起放入盛有1.0ml PBS的Eppendoff管中,編號備用。
  4. 內(nèi)臟或肌肉樣品——用無菌鑷剪夾取待檢樣品2.0g于研缽中充分研磨,再加10mlPBS混勻,或置于組織勻漿器中,加入10mlPBS勻漿,然后將組織懸液轉(zhuǎn)入無菌Eppendoff管中3,000 rpm離心10 min,取上清液轉(zhuǎn)入Eppendoff管中,編號備用。

3. 保存與運送

請遵循目前的流感標(biāo)本采集方案以及標(biāo)準(zhǔn)的流感標(biāo)本儲存、包裝和運送標(biāo)準(zhǔn)和相應(yīng)的航空運輸協(xié)會的規(guī)定。

【檢驗方法】

1.樣本處理和核酸提取(樣本處理區(qū))

建議取 200μl 液態(tài)樣本進行核酸提??;組織樣本可以研磨液進行提取操作??刹捎猛ㄓ玫暮怂崽崛≡噭┖?,請按照試劑盒說明書進行操作;也可選擇其他合適的商業(yè)化產(chǎn)品。

本試劑盒中的陰性質(zhì)控品參與提取,用于對環(huán)境進行監(jiān)控;AIV H5 陽性質(zhì)控品不參與提取,用于 PCR 檢測試劑的質(zhì)控。

3.3 LightCycler480 儀器設(shè)置

  1. 點擊軟件主界面的“New Experiment”,進入程序設(shè)定界面。

 檢測模式設(shè)置:從 Detection Format 的下拉框中選擇分析模式:Multi Color Hydrolysis Probe,“Customizes”模塊中選擇 483-533 濾片組合,“Block Type”為儀器自動檢測, “Plate ID”可手工輸入或掃描儀掃描,“Reaction Volume”設(shè)定為 25ul。

  1. 循環(huán)參數(shù):定義 PCR 程序中每個步驟(Program Name)及循環(huán)數(shù)(Cycles)和分析模式(Analysis Mode),利用“+”和“-”增加或刪除步驟,擴增參數(shù)如下

50℃ 15 分鐘,1 個循環(huán);

95℃ 15 分鐘,1 個循環(huán);

94℃ 15 秒* 58℃ 45 秒,40 個循環(huán);(此步采集熒光信號:“Analysis Mode”選擇“Quantification”,“Acquisition Mode”選擇“Single”)

40℃ 10 秒,1 個循環(huán);

  1. 填樣品表:點擊“SampleEditor”模塊,進入樣本信息編輯界面,在“SelectWorkflow”中選擇“AbsQuant”,在“SampleName”

列中定義樣本名稱,在“Sample Type”欄中選定樣品類型:陰性質(zhì)控品選 NTC;未知樣品選 Unknown。

  1. 運行程序:點擊“Experiment”模塊,回到程序設(shè)定界面,點擊窗口右下方的“StartRun”,彈出結(jié)果保存窗口,輸入文件名和路徑后進入程序運行界面。

4. 結(jié)果分析

4.1 反應(yīng)結(jié)束后保存檢測數(shù)據(jù)文件。

4.2 分析條件設(shè)置:根據(jù)分析后圖像調(diào)節(jié) Baseline 的 start 值、stop 值以及 Threshold 的 Value 值(用戶可根據(jù)實際情況自行調(diào)整, Start 值可以在 3~15、End 值可設(shè)在 5~20,調(diào)整陰性對照的擴增曲線平直或低于閾值線),點擊 Analysis 自動獲得分析結(jié)果,在 Report 界面察看結(jié)果。

4.質(zhì)量控制

陰性質(zhì)控品:擴增曲線無對數(shù)增長期;陽性質(zhì)控品:擴增曲線有明顯對數(shù)增長期,且 Ct 值≤32;

以上要求需在同一次實驗中同時滿足,否則,本次實驗無效,需重新進行。

5.結(jié)果判定

1. 如果檢測樣品的擴增曲線無對數(shù)增長期或 Ct 值>38,可判樣品為禽流感 H5 亞型陰性;

2. 如果檢測樣品 Ct 值≤38,且曲線有明顯的對數(shù)增長期,可判樣品為禽流感 H5 亞型陽性。

【檢測方法的局限性】

樣本檢測結(jié)果和樣本收集、處理、運送及保存質(zhì)量有關(guān),其中任何失誤都將會導(dǎo)致假陰性結(jié)果。如果樣本處理時沒有控制好交叉污染,可能出現(xiàn)假陽性結(jié)果。

【產(chǎn)品性能指標(biāo)】

根據(jù)產(chǎn)品分析性能評估結(jié)果,本試劑盒的靈敏度為 1.0×103copies/ml。與感染部位相同或感染癥狀相似的其他病原體(副流感病毒、新城疫病毒、呼吸道合胞病毒、腺病毒等)無交叉反應(yīng)。

【注意事項】

1.本產(chǎn)品僅用于體外診斷;

2.實驗室管理應(yīng)嚴(yán)格按照 PCR 基因擴增實驗室的管理規(guī)范,實驗人員必須進行專業(yè)培訓(xùn),實驗過程嚴(yán)格分區(qū)   進行(試劑準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、擴增和產(chǎn)物分析區(qū)),所用消耗品應(yīng)滅菌后一次性使用,實驗操作的每個   階段使用的儀器和設(shè)備,各區(qū)各階段用品不能交叉使用;

3.為試劑和標(biāo)本準(zhǔn)備階段提供生物安全柜,實驗過程中穿工作服,帶一次性手套,使用自卸管移液器;

4.試劑使用前要*解凍,8,000rpm 離心數(shù)秒后使用;

5.標(biāo)本制備區(qū)所用過的吸頭請打入盛有消毒劑的容器,并與廢棄物一起滅菌后方可丟棄;

6.實驗完畢用 10%次氯酸或 75%酒精處理工作臺和移液器,然后用紫外線燈照射 20-30 分鐘;

7.本試劑盒內(nèi)陽性質(zhì)控品應(yīng)視為具有傳染性物質(zhì),操作和處理均需符合相關(guān)法規(guī)要求:衛(wèi)生部《微生物生物

醫(yī)學(xué)實驗室生物安全通用準(zhǔn)則》和《醫(yī)療廢物管理條例》。                                     

新城疫病毒/禽流感病毒核酸檢測試劑盒

廣州創(chuàng)侖禽流感病毒通用型核酸檢測試劑盒                                            禽流感病毒H9亞型核酸檢測試劑盒

鴨瘟病毒核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)                           

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