羊抗人IgG血清
【簡(jiǎn)單介紹】
【詳細(xì)說(shuō)明】
羊抗人IgG血清
:
名 稱:羊抗人IgG
濃 度: 1mg/1ml
抗體來(lái)源(宿主):兔源多抗、鼠源
克 ?。?jiǎn)慰寺】贵w、多克隆抗體
適 用:Human, Mouse, Rat, Chicken
抗體類型:一抗
研究領(lǐng)域:細(xì)胞生物、神經(jīng)生物學(xué)等
性 狀:凍干粉或液體
保 存: Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature foR At least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable foR At least two weeks at 2-4 °C.
相關(guān)標(biāo)記:FITC、Gold 、HRP、PE PE-Cy3、PE-CY5、PE-CY5.5 、PE-CY7 、RBITC 、 Alexa Fluor 350、Alexa Fluor 488 、 Alexa Fluor 555 、Alexa Fluor 647、AP 、APC 、Biotin 、Cy3 、Cy5 、Cy5.5 、Cy7 。
儲(chǔ) 存 液: Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4 or PBS with 0.1% sodium azide and 50% glycerol pH 7.3. -20oC, Avoid freeze / thaw cycles.
羊抗人IgG優(yōu)質(zhì)供應(yīng),相關(guān)抗體:
JL-1800R Anti-PACAP-38抗體,腺苷酸環(huán)化酶激活肽-38抗體
JL-1801R Anti-GFRα-1/GDNF抗體,GDNF家族受體α-1抗體
JL-1802R Anti-ET-1抗體,內(nèi)皮素-1抗體
JL-1803R Anti-ACEI|血管緊張素1轉(zhuǎn)換酶抑制劑抗體
JL-1805R Anti-GHRF/GHRH抗體,生長(zhǎng)激素釋放激素因抗體
JL-1806R Anti-TSHR 抗體,促甲狀腺素受體抗體(C端)
JL-1808R Anti-GLP-2抗體,胰高血糖素樣肽-2抗體
JL-1810R Anti-Tubulin-β抗體,微管蛋白
JL-1811R Anti-Shank1抗體,shank-1抗體
JL-1812R Anti-HEV抗體,戊型肝炎病毒抗體
JL-1813R Anti-HCV-NS4a抗體,丙型肝炎病毒-NS4a抗體
JL-1814R Anti-ICAD/DFF-45β抗體,Caspase 激活的脫氧核糖核酸酶抑制劑抗體
JL-1815R Anti-FAS/Apo-1/CD95抗體,載脂蛋白A1抗體
JL-1816R Anti-FasL抗體,FasL抗體
JL-1817R Anti-BFGF/FGF-2抗體,堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子抗體
JL-1818R Anti-HCV-NS1抗體,丙型肝炎病毒-NS1抗體
JL-1819R Anti-HCV-NS3抗體,丙型肝炎病毒-NS3抗體
JL-1820R Anti-CT-R抗體價(jià)格好,降鈣素受體抗體
JL-17001 胰蛋白胨大豆肉湯 250 85 用于金黃色葡萄球菌的MPN測(cè)定,增菌培養(yǎng),NaCl濃度可根據(jù)需要而調(diào)整(GB、SN標(biāo)準(zhǔn))
Trypticase (Tryptic) Soy Broth
JL-17002 Baird-Parker瓊脂基礎(chǔ) 250 225 用于金黃色葡萄球菌的選擇性分離培養(yǎng)(GB、SN標(biāo)準(zhǔn))
Baird-ParkeR Agar Base
JL-17003 亞碲酸鹽卵黃增菌液 5ml*10 65 加入Baird-Parker瓊脂基礎(chǔ)中
Egg-Yolk lurite Emulsion
JL-17004 兔血漿 0.5ml*20 130 用于金黃色葡萄球菌凝固酶試驗(yàn)
Rabbit Plasma
JL-17005 DNA酶瓊脂 100 360 用于核糖核酸酶檢測(cè)
單克隆抗體制備方法: (一)雜交瘤細(xì)胞的大量繁殖
克隆化的細(xì)胞可以在體外進(jìn)行大量培養(yǎng),收集上清液而獲得大量的單一的克隆化抗體。不過(guò)體外培養(yǎng)法得到的單克隆抗體有限,其不能超過(guò)特定的細(xì)胞濃度,且每天要換培養(yǎng)液。而體內(nèi)雜交瘤細(xì)胞繁殖可以克服這些限制。雜交瘤細(xì)胞具有從親代淋巴細(xì)胞得來(lái)的腫瘤細(xì)胞的遺傳特性。如接種到組織相容性的同系小鼠或不能排斥雜交瘤的小鼠(無(wú)胸腺的裸鼠),雜交瘤細(xì)胞就開(kāi)始無(wú)限地繁殖,直至宿主死亡。產(chǎn)生腫瘤細(xì)胞的小鼠腹水和血清中含有大量的雜交瘤細(xì)胞分泌的單克隆抗體,這種抗體的效價(jià)往往高于培養(yǎng)細(xì)胞上清液的100~1 000倍。
利用免疫抑制劑,如降植烷、液體石蠟、抗淋巴細(xì)胞血清等,可以加速和促進(jìn)腫瘤的生長(zhǎng)。
1.材料
?。?/span>1)經(jīng)高壓滅菌的降植烷。
(2)Balb/c鼠:5~8周齡。
(3)雜交瘤細(xì)胞:取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞。
(4)RPMI—1640培養(yǎng)液
(5)新生牛血清
2.操作方法
?。?/span>1) 于小鼠腹腔注射0.5ml降植烷,注射后1~9周內(nèi)種植細(xì)胞。
?。?/span>2) 收取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的雜交瘤細(xì)胞,用5%FCS—1640液洗滌一次,1 000r/min離心10min。
(3) 取樣,用臺(tái)盼蘭染色,計(jì)活細(xì)胞數(shù),重新用5%FCS—1640液配成1.0×107細(xì)胞/ml的懸液。
(4) 給注射了降植烷的小白鼠接種雜交瘤細(xì)胞,每只腹腔注射1ml(含1.0×107個(gè)細(xì)胞/ml)。
(5) 接種后10天左右時(shí)間腫瘤體積zui大,此時(shí)可由腹腔抽取腹水,每隔1~3天取1次,可取10次。血清可由腋下動(dòng)脈或心臟采血后分離。
(二)單克隆抗體的提純
1.材料
(1) 20mMol/L pH7.8~7.9Tris—HCl緩沖液
20 mMol/L NaCl
(2) 20mMol/L pH7.8~7.9Tris—HCl緩沖液
40mMol/L NaCl
(3) 20mMol/L pH7.8~7.9Tris—HCl緩沖液
80 mMol/L NaCl
(4) 20mMol/L pH7.8~7.9Tris—HCl緩沖液
(5) 飽和硫酸銨液
(6) DEAE—纖維素柱
2.操作方法
(1)小鼠腹水用冷PBS液稀釋4倍后,于1.00×105轉(zhuǎn)離心30min,去沉淀。
(2)在4℃于上清中緩緩滴加飽和硫酸銨液,邊加邊攪拌,使溶液zui終為50%硫酸銨濃度。
(3)此溶液置冰中30min~60min,然后5 000r/min離心10min,去上清。
(4)將沉淀溶于Tris-HCl緩沖液(40mMol/L NaCl)中(溶液可能混濁)。
(5)裝入透析袋于Tris-HCl緩沖液(20 mMol/L NaCl)中透析除鹽。
(6)離心去沉淀。
(7)溶液稀釋(1:100或更高倍稀釋)后,于280nm測(cè)蛋白含量,估計(jì)蛋白質(zhì)含量
1A 280unit=0.8mg蛋白質(zhì)
一般每ml腹水中,含有總蛋白約25mg~36mg。
(8)過(guò)DEAE—纖維素柱:纖維素柱高40cm,以20mMol/L NaCl Tris緩沖液平衡。透析樣品以Tris緩沖液等量稀釋。
樣品進(jìn)入柱床速度為1ml~2ml/min,以NaCl線形梯度洗脫。大部分單克隆IgG于40 mMol/L和80mMol/L NaCl洗脫,也有極少例外的單克隆抗體于120 mMol/L ~150 mMol/L NaCl洗脫。
測(cè)OD280nm收集蛋白峰,單克隆IgG保存?zhèn)溆谩?/span>
雜交瘤產(chǎn)生各種免疫球蛋白,但主要是IgG和IgM,究竟是哪種為主,則決定于抗原的免疫程序。免疫一次,且3天后就取脾,多為產(chǎn)生IgM的B淋巴細(xì)胞。免疫多次的多為IgG。
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