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技術(shù)文章
離心機及轉(zhuǎn)子的分類
點擊次數(shù)：2184 發(fā)布時間：2021-3-25
一．離心機的分類：
國際上對離心機的分類方法有三種：按用途分、按轉(zhuǎn)速分和按結(jié)構(gòu)分。
按用途分類：分為制備型離心機和制備分析離心機。
制備型離心機：僅供分離濃縮，提純試樣的離心機。
制備分析離心機：不但能分離濃縮、提純試樣，而且可以通過光學(xué)系統(tǒng)對試樣的沉降過程進行觀察、拍照、測量、數(shù)字輸出、打印自動顯示的離心機。
按轉(zhuǎn)速分類：分為低速離心機、高速離心機、超速離心機。
低速離心機：轉(zhuǎn)速在10000rpm以內(nèi)或相對離心力在15000×g以內(nèi)。
高速離心機：轉(zhuǎn)速在10000∽30000rpm以內(nèi)或相對離心力在15000∽70000×g以內(nèi)。
超速離心機：轉(zhuǎn)速在30000rpm以上或相對離心力在70000×g以上。
按結(jié)構(gòu)分類：
一般在高速和低速離心機根據(jù)結(jié)構(gòu)和功能進行分類，品種繁多，各廠家命名也無統(tǒng)一標準?？煞譃榕_式離心機、多管微量臺式離心機、細胞涂片離心機、血液洗滌臺式離心機、高速冷凍離心機、大容量低速冷凍離心機、低速冷凍離心機、臺式高速冷凍離心機、臺式低速自動平衡離心機等。另外國外還有三聯(lián)式(五聯(lián)式)高速冷凍離心機，專作連續(xù)離心用。
二．轉(zhuǎn)子的分類應(yīng)用及特點
轉(zhuǎn)子是離心機用于分離試樣的核心部件，轉(zhuǎn)子規(guī)格、品種的多少是衡量離心機生產(chǎn)技術(shù)掌握程度的重要標志，轉(zhuǎn)子一般可分為下列五大類：
固定角轉(zhuǎn)子(Eixed-Angle-Rotor)：
主要用于分離沉降速度有明顯差異的顆粒樣品。顆粒在扇形溶地移動的距離很短，碰到外壁的顆粒沿著管壁滑到管底，形成沉淀，因此這種轉(zhuǎn)子能很快地收集沉淀物。分離過程中，由于管壁的作用，在離心管內(nèi)將會引起強烈的對流，對具有相同沉降速率的顆粒會產(chǎn)生不佳影響。
甩平轉(zhuǎn)子(Siwing-Bucket-Rotor)：
主要用于樣品作密度梯度離心。顆粒移動距離長，溶液中的組分相對于管壁的位置在離心過程中和離心后不發(fā)生改變，因此離心效果好，但因顆粒在離心場中是從旋轉(zhuǎn)中沿徑向散離出去，而不是按相互平行的路線沉降。顆粒碰到外壁沿著管壁滑到管底，因此也會產(chǎn)生對流。(但比固定角轉(zhuǎn)子小)低速時啟動或停機時會產(chǎn)生振動，影響分離效果，甩平轉(zhuǎn)子有敞開式和封閉式兩種，一般制備容量大，轉(zhuǎn)速小于10000RPM，離心力場在16000xg以內(nèi)的，作成敞開式，主要用于樣品的初分離。制備容量較前者小，轉(zhuǎn)速大于10000RPM，離心力場在16000xg以上的，為了減少風(fēng)力的影響，一般作成封閉式，主要用于線粒體、葉綠體、細胞核等的分離和密度梯度離心。
連續(xù)離心轉(zhuǎn)子(Continuous-Flow-Rotor)：
主要用于懸浮介質(zhì)中高速分離較小的顆粒物質(zhì)，如在培養(yǎng)基中分離細胞，在運轉(zhuǎn)過程中，懸浮樣品以一定速度從轉(zhuǎn)子體中心流入離心池，由于溶液中的組分輕重不同，在離心力場作用下，重粒子具有較大的慣性離心力、沉降快，當(dāng)流速增大(降低)到一定值時，重粒子將留在離心池外緣底部，而介質(zhì)將從出口流出并帶走較輕的粒子，收集組分的方法是把組分沖洗出離心池或者留在轉(zhuǎn)子體內(nèi)，這種轉(zhuǎn)子是利用離心淘析技術(shù)對整細胞或大的亞細胞粒子進行分離，在無菌和低溫條件下，被分離的組分，能保持活性，回收率高等優(yōu)點。如果液流方向與離心力方向相反，即降低了粒子運行速度，相當(dāng)于增長了運行距離，從而提高了分辨能力。
區(qū)帶轉(zhuǎn)子(Zonal-Rotor)：
主要用于大容量的密度梯度離心，當(dāng)實驗所需制備的樣品量多，而甩平轉(zhuǎn)子因受到量的限制時，采用區(qū)帶離心是較好的。主要由帶有四塊葉片的轉(zhuǎn)子體和密封系統(tǒng)組成，轉(zhuǎn)子體和四塊葉片將離心池分為四個扇形小室，阻止溶液在離心池中旋轉(zhuǎn)，葉片上有徑向?qū)Ч?，溶液通過導(dǎo)管從中心流向轉(zhuǎn)子體外壁，裝樣和取樣時應(yīng)小心，裝樣一般在2500∽3000rpm運轉(zhuǎn)中進行，首先將梯度液中較輕的部分通過密封管道泵入轉(zhuǎn)子內(nèi)，由于慣性力的存在，梯度液在轉(zhuǎn)子外壁的垂直方向形成均勻的一層，再依次將密度較高的梯度液泵入，隨著密度的增高和梯度液的不斷泵入，密度較低的梯度液被推向中心，直到轉(zhuǎn)子*裝滿，然后通過密封組件中心輸液管把待分離的樣品(其密度與梯度液中*輕的密度部分還低)加入，接著把密度更低的溶液注入，用以取代中心附近的樣品，裝完后，移去密封組件，蓋上轉(zhuǎn)子蓋，在一定轉(zhuǎn)速離心一定時間后，轉(zhuǎn)速降至2500∽3000rpm，裝上密封組件及輸液管，通過泵入較密的液體到轉(zhuǎn)子的液體由輕至重依次擠出。
區(qū)帶轉(zhuǎn)子避免了用離心管所引起的壁效應(yīng)(Walleffects)和干擾，提高了分辨率。
垂直轉(zhuǎn)子(Vertical-Tube-Rotor)：
主要用于樣品在短時間作密度梯度離心。甩平轉(zhuǎn)子分離粒子位移距離長，分辨能力高，分離后組分的區(qū)帶較寬，便于回收，但所需時間長，垂直轉(zhuǎn)子分離的粒子位移距離等于離心管直徑。轉(zhuǎn)子轉(zhuǎn)動前，管內(nèi)密度梯度溶液的密度是沿重力方向變化，轉(zhuǎn)動后，溶液的密度逐漸改變?yōu)殡x心力方向(水平方向)變化，離心結(jié)束后，溶液的密度變化方向因重力作用又沿鉛垂方向變化，形成鉛垂方向的密度梯度，由于離心管是垂直放置，所以溶液粒子位移的距離等于離心管的直徑。離心時間短，離心后樣品組分的區(qū)帶較寬，但因離心時間短，粒子得不到充分分離，將會失去一些組分，又因區(qū)帶與梯度介質(zhì)的接觸面大，易于擴散，停機后密度重新定向，易于混合，所以作區(qū)帶離心的效果，垂直轉(zhuǎn)子不于甩平轉(zhuǎn)子。
離心機轉(zhuǎn)子的轉(zhuǎn)速跟轉(zhuǎn)子的材料和強度有關(guān)，一般采用強度好、重量輕的超硬鋁合金(LC4)，超速離心機采用鈦合金(TiC4)。一般來說，對同一離心機重量輕、容量小的轉(zhuǎn)子轉(zhuǎn)速要高，反之轉(zhuǎn)速要低。轉(zhuǎn)子的保養(yǎng)及壽命管理在以后的章節(jié)中介紹。