為了消除HPLC分析中的干擾,應該遵守以下一些規(guī)則:
高純水應該在用水地點制取而不要放置;
所用的純水機應該具備塑料組成、作為吸附和離子交換的純化裝置應該為半導體級的質量、應該具備UV-氧化裝置和專門設計的過濾器;
水路系統(tǒng)、樣品前處理和脫氣裝置都應在使用前沖洗干凈。新裝的過濾器應該預先用8~10L水進行沖洗。
每次取水時其前面的50~100ml水應棄之不用。進行樣品前處理和脫氣過濾時均應按照廠家說明書進行沖洗。玻璃容器應該用薄膜蓋住。在400℃灼燒1h然后用薄膜蓋好備用。
除此之外本規(guī)則還適用于其他有機分析,包括總有機碳分析(TOC)、近紅外分析和GC/MS。
無論是質譜分析、氣相色譜還是液相色譜,幾乎沒有一種分析方法可以不用純水能夠進行的。本文討論了以下幾個問題:水的純度如何影響HPLC,水中有機物的污染來自何處,為了消除這些影響可以采用哪些技術?
水是分析實驗室用得zui多的試劑,它每天被用來配制緩沖溶液、實驗室試劑、校正標準溶液、培養(yǎng)基和樣品溶液。特別是高純水的應用對于任何科學部門無論是科研還是制藥或者化妝品以及食品部門,都是*的。
純水可以定義為一種不含有任何對實驗室分析方法、試劑或者標準有潛在影響的物質。鑒于在無數的方法實驗以及在進行包括液相、氣相、質譜分析樣品制備時均需大量用水,因此純水的獲取便具有決定性的意義。
污染對HPLC的影響
現(xiàn)代分析實驗室儀器,例如電感耦合等離子光譜/質譜(ICP/MS)、氣相色譜/質譜(GC/MS)、液相色譜和熒光分析等的檢測限位于ppb-范圍或更低。正是由于這樣的數值使得遭遇污染的風險更高。水中有機痕量化合物的分析檢測日益成為實驗室的一大問題,它可能影響色譜峰的分離度和積分、可能導致鬼峰、還可能改變固定相的選測性以及影響色譜基線。反相HPLC可以用來對有機物進行鑒定和定量。為保證研究者取得的實驗結果,必須降低或消除這些有機污染物。
此外,非有機類的污染也可能對實驗帶來間接性的干擾,對此亦應加以關注。水中污染物,例如無機離子、顆粒物或者溶解氣體,可能在樣品制備過程中與試劑或溶質發(fā)生反應、污染柱子或檢測器,降低使用壽命。在采集分析數據時為了取得準確和重現(xiàn)性的測試結果,使用純水也是zui基本的要求。超微量HPLC則對純水的應用提出了更為苛刻的要求。