MDA-MB-435 人乳腺癌高轉移細胞,ATCC 細胞|細胞系|細胞株|細胞培養(yǎng)條件:
*培養(yǎng)基:DMEM高糖培養(yǎng)基90%;胎牛血清10%。
培養(yǎng)條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
MDA-MB-435 人乳腺癌高轉移細胞傳代方法: 收到細胞后,取出培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況。
(一)如果細胞未長滿,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內,嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶,吸出培養(yǎng)液,僅留下10ml培養(yǎng)液在瓶內繼續(xù)培養(yǎng)。
(二)如果細胞已長滿,含即可進行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下:
1. 棄去培養(yǎng)液,用PBS(不鈣,鎂離子)洗1-2次。
2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,倒轉放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預熱,然后又將培養(yǎng)瓶倒轉大約30秒后,在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓分散,輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶,細胞隨即脫落下來。
3. 加入6-8ml*培養(yǎng)基,吸出,分到新的培養(yǎng)瓶中。1:3~1:6傳代;2~3天1次?!?/p>
。
注意:傳代后一半用我們的培養(yǎng)基,一半用你們的,以免細胞不適應而造
成生長不好。
凍存方法: 凍存液:基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
儲存:液氮儲存