奧林巴斯熒光顯微鏡——光學(xué)部件
奧林巴斯熒光顯微鏡——物鏡
奧林巴斯熒光顯微鏡通常備種物鏡均可應(yīng)用,但為了提高熒光圖象的亮度,應(yīng)盡可能提高物籬的數(shù)值孔巴X.A,故采用一些特殊玻璃或結(jié)構(gòu)的物洗裝備于熒光顯極統(tǒng)。如西德OFTON廠的熒石物鏡和單色透紫外物鏡等,它們的數(shù)值孔徑N.A往往比同答焦距的消色差物笛的數(shù)值孔徑高15—30%。由標(biāo)本圖象的亮度是與物鏡數(shù)值孔徑N.A的平方成正比,而與放大倍數(shù)成反比,因此使用時(shí)應(yīng)注意這一點(diǎn)。
的物鏡,若使用短波紫外線為激發(fā)光叭其鏡片必須能透過(guò)紫外線,而且在光源的激發(fā)下不致發(fā)生熒光,另外貿(mào)片的膠合也不能用冷杉樹(shù)脂肢(加拿大膠),因它會(huì)發(fā)生輕度的焚兒所以一定要用合成膠,如聚乙烯醇之類。
——目鏡
在中,基于上述原因,盡量考慮避免在光路中的光線損失。
——標(biāo)本
為保證鏡檢的效果,對(duì)標(biāo)本設(shè)置也應(yīng)有所注意。
·載殃片奧林巴斯熒光顯微鏡如用短波紫外光為激發(fā)光時(shí),必須各有能透過(guò)續(xù)外線的載玻片,其厚度約為o.8—1.2mm,以免致吸收過(guò)多,且易于使激發(fā)光在標(biāo)本面上聚焦,否則,對(duì)使用暗場(chǎng)霞光器影響較大。另外,戴玫片必須光潔,厚度均勻無(wú)油邊、無(wú)劃痕。
·蓋玻片
為加強(qiáng)激發(fā)光,可用干涉差玻爾這種蓋玻片的表面鍍有若干層對(duì)不同波長(zhǎng)的光而起不同干涉作用的物質(zhì),如mspz(氟化鎂)它可以透過(guò)熒光,而反射激發(fā)光。這種激發(fā)光又可激發(fā)標(biāo)本。
·標(biāo)本的標(biāo)本不能太民散樣要均場(chǎng)其目的使標(biāo)本能
得到充分激發(fā),另外避免紉跑重疊或雜質(zhì)掩蓋,影響判斷。
·封栽劑的封載劑必須無(wú)熒光、無(wú)顏色。通常使用優(yōu)級(jí)分析純比油鹽水緩沖浪(90%七油、lo%磷酸鹽緩沖水,pH7.1—8.6)。為了固定蓋玻片,可用o.5%明膠,加到破片后以10%福爾馬林因免也可用淀粉營(yíng)。長(zhǎng)期保存的標(biāo)有可用二甲苯混合封栽劑,如DPX(即酞酸二丁朗10毫升、聚苯乙烯25克,二甲苯70毫升混合而成)。
·澆油原則上的入鏡油本身必須不受激發(fā)光。因此普通顯微鏡所用的香柏油不能直接陵用,必須加入一定量的硝基苯(熒光熄滅劑)才勉強(qiáng)用,但這樣往校會(huì)減弱標(biāo)本本身的熒光因此效果不佳。純松香油無(wú)固有熒光,可以使用。液體石臘和純甘油(加10%磷酸緩沖鹽水)是比較好的代用品,它們都可以用水洗比用起來(lái)很方便,只是折光串較仇對(duì)圖象質(zhì)量略有影響,如果配合使用勝油浸液物鏡那就更好了。