徠卡顯微鏡-顯微圖像分析系統(tǒng)的工作程序

1．標(biāo)本成像：慢慢移動(dòng)標(biāo)本，使需要被觀察的部位能在顯微鏡上得到適當(dāng)放大的圖像。

2．圖像獲??；鼠標(biāo)點(diǎn)擊打開顯微圖像分析系統(tǒng)的功能，以進(jìn)行圖像采集與獲取。

3．檢測(cè)：徠卡顯微鏡在圖像分析過(guò)程中設(shè)法從圖像中確定并且分離出需要分析的指標(biāo)相。“相”是圖像中要測(cè)量的部分的總稱。在檢測(cè)過(guò)程中要使用圖像框（im，印frame）和測(cè)量框（measurementframe）。檢測(cè)只在圖像框內(nèi)進(jìn)行，框的大小按需要而定，測(cè)量框在圖像之內(nèi)，是進(jìn)行測(cè)量的部位。兩個(gè)框之間的部分稱為保險(xiǎn)區(qū)。圖像中每個(gè)被測(cè)物部有其*的特征計(jì)算點(diǎn)（feaurecountpoint，F(xiàn)CP），F(xiàn)CP在被測(cè)物的zui低點(diǎn)，如圖1，13中上面lo個(gè)被測(cè)物的FcF均在測(cè)量框內(nèi)，可計(jì)數(shù)或作其他測(cè)量，而zui下面2個(gè)被測(cè)物的FcP不在測(cè)量框內(nèi)，則不計(jì)在內(nèi)，在測(cè)其他區(qū)域時(shí)再計(jì)算，有的被測(cè)物可能被測(cè)量框截?cái)?，那么測(cè)量框外的那部分被測(cè)物應(yīng)該位于保險(xiǎn)區(qū)，即保險(xiǎn)區(qū)要大于被測(cè)物，才能觀察FcP是否在測(cè)量框內(nèi)而決定取舍。這樣當(dāng)換到相鄰的區(qū)域進(jìn)行測(cè)量時(shí)，不會(huì)使萊圖形重復(fù)測(cè)量，可避免測(cè)量誤差。圖1—14顯示放置標(biāo)本的顯微鏡鏡臺(tái)的移動(dòng)方式，可由計(jì)算機(jī)控制，用編制好的程序，使鏡臺(tái)按一定方式移動(dòng)，也對(duì)以人工操作。圖中可以看出每個(gè)部他都將通過(guò)測(cè)量框，不會(huì)遺漏。

4．陰影校正；徠卡顯微鏡校正圖像細(xì)節(jié)直到正確無(wú)誤并達(dá)到朗被測(cè)量的要求。所謂陰影是指肉眼看來(lái)是均勻的視場(chǎng)內(nèi)存在著不均勻的電子反應(yīng)，這使得灰度相同的圖像成分由于在視場(chǎng)中所處位置不同而顯示出不同的灰皮，這種影響必須校正才能使圖像得到準(zhǔn)確測(cè)量。陰影有三個(gè)主要的來(lái)源：圖像源的不均勻光照、穿過(guò)透鏡時(shí)光路發(fā)生變化引起的透鏡明影和顯像管本身的圖像靈敏度差異引起的掃描陰影。任何圖像分析在具體運(yùn)用中都有這些陰影存在，前二者可通過(guò)安裝精密圖像分析儀來(lái)控制，后者可通過(guò)對(duì)顯像管的質(zhì)量嚴(yán)格篩選來(lái)減少影響。陰影可貯存起來(lái)，并且在每次掃描時(shí)同步地從圖像信號(hào)中去掉。

總之，經(jīng)過(guò)以上各測(cè)量步驟后，可以用徠卡顯微鏡圖像分析儀對(duì)圖像進(jìn)行測(cè)量以取得所需的參數(shù)，如灰度、面積、長(zhǎng)度、個(gè)數(shù)等。原始的參數(shù)可由計(jì)算機(jī)轉(zhuǎn)化成容易理解的數(shù)值，例如面積可內(nèi)某圖形所占像素?cái)?shù)轉(zhuǎn)化為平方微米，使觀察者容易理解。

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