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尼康顯微鏡--浸潤物鏡
在尼康顯微鏡中使用于系物鏡時,標本和物鏡前透鏡之間的介質(zhì)是空氣。當來自標本的光線從蓋玻片進入空氣時,根據(jù)折射定理,與光軸傾斜大于41.5°的光線根本不能透過蓋玻片而*被反射。41.5°的角被稱為玻璃一空氣臨界角,而41.5°的光錐能夠進入物鏡透鏡的實際只有36°。當用水來作介質(zhì)時,光線從益破片進入水中所引起的折射也就小一些,水的臨界角是61.5°,而實際能夠進入物鏡的只有52°。如果用折射串為1.52的浸油作介質(zhì)時,當光線從蓋玻片進入浸油時不會引起折射現(xiàn)象,它的臨界角是90°,然而被物鏡所能接受的也只有64°(田3.3)。
從圖3.3中,我們還可以看到光線經(jīng)過介質(zhì)以后的情況。當光線從蓋玻片上面經(jīng)過介質(zhì)后,便傾斜地到達物鏡前透鏡,并與光軸成大約64°的角度,達一角度不論是在干系、水浸或油浸系中都大致相似。其原因是蓋玻片到物鏡前透鏡曲距離一級很近,所以這個角度變化不大。在于系物鏡中,由于空氣的折射率n=1,于系物鏡的數(shù)值孔徑
N.A.=nsinu=l×sin64。=0.90
在上式中,要想再加大角u是不可能的,因此就限制了光學(xué)顯微鏡的分辨力。但是,如果用折射串大于1的浸潤液體克滿蓋玻片與物鏡前透鏡之間的空間,就可以產(chǎn)生1.00或更大的數(shù)值孔徑。例如使用水作浸潤介質(zhì)時,其數(shù)值孔徑為:
N.A.=ns5nu=1.33×2in64°=1.20
使用甘油時,物鏡的數(shù)值孔徑可以達到1.25,當使用折射牢為1.515的浸油時,其數(shù)值孔徑為:
N.A.=nsinu=1.515×sin64°=1.36
尼康顯微鏡因此,油浸物鏡的使用,大大提高了數(shù)值孔徑,這就使得尼康顯微鏡的分辨力得到進一步提高。
在油浸的情況下,如果使用折射率低于玻璃或浸油(n≈1.5左右)的封藏介質(zhì),由于達時與光鈾角度較大功光線被折射或反射以至于不再參與像的形成,就會使像發(fā)生昏?,F(xiàn)象并伴隨著分辨力的降低,這樣由于增大孔徑而帶來的浸潤系統(tǒng)的優(yōu)點就會喪失。從理論上來說,使用折射串超過1.5的浸潤介質(zhì)時,物烷數(shù)值孔徑的zui大值可以進一步增大。而且現(xiàn)在使用折射率為1.66的特殊浸潤液的物鏡已經(jīng)被制造出來了,它采用沒有蓋玻片的斜射照明。主耍應(yīng)用于冶金學(xué),其數(shù)值孔徑可達到1.6。
尼康顯微鏡每一種浸潤物鏡只能同相應(yīng)的一種涅潤介質(zhì)使用,實際上浸潤液已成為構(gòu)鏡的一個組成部分。因此、浸潤物鏡不能在沒有浸潤液的情況下使用:反之,“干系”物鏡也不能同浸潤液一起使用。同樣水澄徹鏡不能使用油涅;油漫物銳世不能使用水浸。因此在使用——臺不太熟悉的顯微鏡時,首先要并清楚哪些物鏡是浸潤物鏡以及使用什么樣的浸潤液,油授物鏡—般標有“Oel”字樣;水浸物鏡標有“W.I”或“WAS’字樣。另外對于質(zhì)量要求高的工作,除了浸潤液的折射率以外,還應(yīng)該考慮到它的色散性能。
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