您好, 歡迎來到化工儀器網(wǎng)! 登錄| 免費(fèi)注冊| 產(chǎn)品展廳| 收藏商鋪|
當(dāng)前位置:上海一基實(shí)業(yè)有限公司>>公司動(dòng)態(tài)>>普魯士藍(lán)染色液(核固紅法)操作說明
普魯士藍(lán)染色液(核固紅法)
產(chǎn)品簡介:
含鐵血黃素(Hemosiderin)是一種血紅蛋白源性色素,為金黃色或棕黃色顆粒,因其
含鐵,且為金黃色,故稱為含鐵血黃素。當(dāng)紅細(xì)胞被巨噬細(xì)胞吞噬后,在溶酶體酶的作用下,
血紅蛋白被分解為丌含鐵的橙色血質(zhì)和含鐵的含鐵血黃素。 Perls 普魯士藍(lán)反應(yīng)(Prussian
blue reaction)又稱為含鐵血黃素染色,即經(jīng)過亞鐵青化鉀和稀酸處理后可以產(chǎn)生藍(lán)色,常
見于吞噬細(xì)胞或間質(zhì)內(nèi),其染色原理在于亞鐵青化鉀溶液使三價(jià)鐵離子從蛋白質(zhì)中被稀鹽酸
分離出來,三價(jià)鐵不亞鐵青化鉀反應(yīng),生成一種丌溶解的藍(lán)色化合物即三價(jià)鐵的亞鐵青化物。
Leagene 普魯士藍(lán)染色用于顯示局部組織內(nèi)的各種出血性病變,常見于吞噬細(xì)胞內(nèi),
可以很好地區(qū)分含鐵血黃素不其他色素。該染色液穩(wěn)定性好、可以長期保存、丌易產(chǎn)生沉淀、
應(yīng)用范圍廣,可以進(jìn)行復(fù)染。該染色液的復(fù)染液采用核固紅,是zui經(jīng)典、zui常用的復(fù)染液。
產(chǎn)品組成:
名稱
2×50ml 2×100ml
試劑(A):
A1: Perls stain A
25ml
25ml
50ml
50ml
RT
RT
Perls stainB A2: Perls stain
臨用前,取 A1、A2 等量混合即為 Perls stain,丌宜提前配制。
試劑(B): 核固紅染色液
50ml
100ml
RT 避光
使用說明書
1 份
自備材料:
1、固定液:10%中性福爾馬林、4%多聚甲醛等
2、系列乙醇
操作步驟(僅供參考):
(一)石蠟切片染色:
1、組織固定于 10%中性福爾馬林,常規(guī)脫水包埋。
2、切片厚度 4μm,常規(guī)脫蠟至水。
3、蒸餾水水洗 1min。
4、切片入 Perls stain(見注意事項(xiàng) 2),浸染 15~30min。
5、蒸餾水充分沖洗 2~5min。
6、入核固紅染色液,淡染細(xì)胞核 5~10min。
7、自來水沖洗 1~5s。
8、常規(guī)脫水透明,中性樹膠封固
(二)冰凍切片染色:
1、無需脫蠟,直接迅速用蒸餾水沖洗 2~3min。
2、染色、脫蠟、透明、封固步驟同石蠟切片的染色步驟,時(shí)間可以相應(yīng)縮短。
(三)細(xì)胞染色:
1、4%多聚甲醛固定 10~20min。
2、自來水沖洗 2 次,每次 2min。
3、蒸餾水沖洗 2 次,每次 2min。
4、染色、脫蠟、透明、封固步驟同石蠟切片的染色步驟,時(shí)間可以相應(yīng)縮短。
染色結(jié)果:
含鐵血黃素或三價(jià)鐵
細(xì)胞核、其他組織
藍(lán)色
紅色
陰性對照(可選):
取相同切片脫蠟至水。入 5%草酸孵育 2~6h,經(jīng) Perls stain,其余步驟同上。結(jié)果為陰性。
注意事項(xiàng):
1、 切片脫蠟應(yīng)盡量干凈。組織固定常采用 10%中性福爾馬林,經(jīng)普通福爾馬林長期固定
后,組織會(huì)有損傷。避免使用酸性固定劑,鉻酸鹽處理也會(huì)妨礙鐵的保存。
2、 整個(gè)操作過程中容器要干凈,避免用金屬鐵制品,洗切片和容器時(shí)以蒸餾水為宜,因普
通水內(nèi)含鐵質(zhì)。Perls stain 染色時(shí),應(yīng)根據(jù)樣本情況調(diào)整著色時(shí)間。
3、 所有切片都應(yīng)使用同一個(gè)陽性對照切片,選擇適合的對照非常重要。尸檢肺組織是一個(gè)
很好的對照,包含相當(dāng)數(shù)量的鐵陽性巨噬細(xì)胞(心衰細(xì)胞)。
4、 冰凍切片和細(xì)胞染色,根據(jù)具體情況摸索實(shí)驗(yàn)條件。
有效期: 12 個(gè)月有效。
相關(guān)產(chǎn)品:
產(chǎn)品編號(hào)
DC0032
DM0007
TC1213
產(chǎn)品名稱
Masson三色染色液
瑞氏-姬姆薩復(fù)合染色液
總膽固醇(TC)檢測試劑盒 (COD-PAP單試劑比色法 )
請輸入賬號(hào)
請輸入密碼
請輸驗(yàn)證碼
以上信息由企業(yè)自行提供,信息內(nèi)容的真實(shí)性、準(zhǔn)確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負(fù)責(zé),化工儀器網(wǎng)對此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。
溫馨提示:為規(guī)避購買風(fēng)險(xiǎn),建議您在購買產(chǎn)品前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。