產(chǎn)品簡介
詳細介紹
Axion細胞實時監(jiān)測系統(tǒng)
MAESTRO Z技術(shù)概述
細胞測試相對于使用組織和動物模型的相關(guān)實驗來說有著通量和成本上的巨大優(yōu)勢,我們因此得以快速開展人類生命的離體探索。但是很多基于細胞樣本的實驗技術(shù)是終點法的,只能得到一個時間點的樣本快照數(shù)據(jù)。Axion BioSystems公司的MaestroZ平臺很好地解決了這個弊端。我們使用基于阻抗檢測的細跑分析技術(shù),使得實時、不間斷且無需標記的細胞監(jiān)測成為可能。對數(shù)據(jù)流的后續(xù)分析可以揭示細胞間互作和細胞一藥物反應(yīng)的動力學(xué),使得您可以更好地理解其機理而需做費時費力的多次終點法實驗。
實時檢測細胞的增殖、形態(tài)和活力
Maestro Z的工作原理
細胞樣本生長在埋入于多孔板底部的電極之上。通過檢測阻抗值的變化,MaestroZ平臺能夠?qū)⒓毎拇嬖谶M行量化。測試時,我們將微小的電信號施加于電極上。當(dāng)細胞貼附于電極并伸展開后,細胞間形成的聯(lián)接將會阻擋住這些電信號的通過,導(dǎo)致阻抗值的讀數(shù)增加。另外,一些細胞結(jié)構(gòu)形態(tài)上的細微改變(比如源于受體介導(dǎo)的信號傳遞或細胞形態(tài)學(xué)變化)也會影響到阻抗值。阻抗檢測的無標記和非侵入特性,使得我們的技術(shù)特別適合被用來定量細胞的動態(tài)反應(yīng),無論您想持續(xù)觀察多久。
細胞實時監(jiān)測系統(tǒng)
阻抗檢測會計算有多少電信號(上圖中青色箭頭所示)被電極-細胞的界面所阻擋。當(dāng)電極末被覆蓋時,電信號能夠輕松穿過,這時阻抗值比較低。當(dāng)細胞蓋住電極時,能夠通過的電信號就變少了,相應(yīng)的阻抗值就會增大。當(dāng)細胞死亡或者脫離電極時,阻抗就會恢復(fù)到基線水平。
實驗流程
活細胞阻抗記錄
MaestroZ阻抗實驗?zāi)軌虮粡V泛地應(yīng)用到各個領(lǐng)域。比如說實時監(jiān)測細胞的生長、腫瘤免液治療實驗
(包括T細胞介導(dǎo)的細胞溶解)細胞毒理以及GPCR介導(dǎo)的信號傳導(dǎo)等等。
MAESTRO Z 應(yīng)用案例
您的細胞樣本專屬功能檔案
基于各自不同的生物學(xué)功能,細胞樣本間的生長、貼附及互作會有所不同。這些特性共同構(gòu)成了一個*的細胞檔案。Maestro Z使您得以記錄這些信息,并基于細胞各種特性(如種類、密度、形態(tài)和貼附)的不同來將它們分開歸檔。細胞功能歸檔可被用于細胞質(zhì)控、純度分析、量化生產(chǎn)速率和優(yōu)化實驗啟動時間點等方面。這些功能的實現(xiàn)無需復(fù)雜的實驗設(shè)定和分析。只需一個按鍵,Maestro Z系統(tǒng)就能穩(wěn)定測試環(huán)境,使您能夠長時間非侵入地監(jiān)測細胞,并提供實時的生長區(qū)曲線和簡明的終點圖示。
我們將Hela細胞按照不同密度種入Cytoview-Z測試板內(nèi),并對其貼附、伸展及增殖的不同生長階段開展監(jiān)測。從上方左邊的圖中我們可以看到對應(yīng)于這些階段的實時阻抗記錄。其中任意時間的終點數(shù)據(jù)(如第16個小時)都可以以柱狀圖的形式單獨表示出來(中圖)。而從右側(cè)的圖示上我們可以看出Hela、
A549、和Calu-3這三種不同的細胞生長曲線都不盡相同。
追蹤免疫介導(dǎo)細胞死亡
神經(jīng)膠質(zhì)瘤是一種惡性腦腫瘤目前并無有效治療方案,預(yù)后生存期也只有12-15個月。而人體免疫系統(tǒng)中的效應(yīng)細跑,有著高特異性和固有的細胞毒性、在未來的腦膠質(zhì)瘤治療中被人們奇予很高的期望。Maestro Z的阻抗測試有著高靈敏、無標記及無損的特點,為連續(xù)監(jiān)控腫瘤細胞增殖和免疫細胞介導(dǎo)的細胞毒性提供了可能性。因此能夠被用來評估免疫治療的效價。
如上左圖所示,我們將惡性膠質(zhì)母細胞瘤細胞株U87MG,以三種不同的細胞密度及四重復(fù)的形式,分成12個樣本種到CytoView-Z阻抗板內(nèi)。使用Maestro Z對其阻抗值變化持續(xù)監(jiān)測24小時后,以10:1的比例將被激活的人T細胞加入到這些樣本孔內(nèi),后續(xù)的確能夠觀察到阻抗值的降低。這和預(yù)期中的T細胞介導(dǎo)的U87細胞裂解效應(yīng)是一致的。對比之下,那些未經(jīng)處理的腫瘤細胞樣本(淺藍色顯示),其同時段測得的阻抗值則繼續(xù)上升。
上中圖則顯示了在這三種處理條件下(不同的細胞數(shù)量),檢測到的的實時細胞裂解比例。在這基礎(chǔ)上,我們就能如上右圖所示,對每種處理方案的KT50(裂解50%腫瘤細胞所需時間)值進行計算。可以看翻,要達到更快的U87MG細胞殺傷速度,我們就需要更高的T細胞密度。
細胞毒性的動態(tài)研究
當(dāng)您想要測試新藥或者細胞治療的效果時,傳統(tǒng)的終點法實驗只能區(qū)分細胞樣本的死活,而無法了解細胞反應(yīng)的動態(tài)過程并對背后的機理做出解釋。Maestro Z所提供的無標記、非侵入的連續(xù)監(jiān)控能力,就使您得以捕捉到細胞毒性的全程。不僅能看到毒性的程度,還能揭示其動態(tài)學(xué)和細胞死亡的速率。通過這些細胞反應(yīng)的動態(tài)表現(xiàn),您往往更能洞悉一個藥物的效力及機理。
用Doxorubicin藥物處理A549細胞后,阻抗測試揭示了樣本的動態(tài)反應(yīng)(上左圖為實時連續(xù)檢測結(jié)果,中圖為虛線處單個時間點的讀數(shù))。在同一塊板上,我們可以將Dox藥物處理組的阻抗數(shù)據(jù)和細胞生長組(未加藥對照)及細胞死亡組(加入Tergazymel)的相關(guān)數(shù)據(jù)做比對,從而得知Dox藥物導(dǎo)致細胞溶解比例的實時效應(yīng),并能夠覆蓋藥物反應(yīng)的整個過程。
感知受體介導(dǎo)的快速信號傳導(dǎo)
經(jīng)由信號傳導(dǎo)通路,細胞能夠接收外界的信息。胞外信號分子與細胞表面的對應(yīng)受體結(jié)合后,細胞內(nèi)的信號傳導(dǎo)就會被觸發(fā),并終決定細胞的行為。跨膜受體中的大家族是G蛋白偶聯(lián)受體(GPCRs)。被結(jié)合后,它們將導(dǎo)致細胞構(gòu)象的改變并引起下游的一系列反應(yīng)。這些細微的變化通常發(fā)生迅速,但其對細跑生理的重大影響卻能夠持續(xù)幾分鐘至幾個小時。通過阻抗檢測,我們能夠?qū)⑵洳东@并量化。Moestro Z的高靈敏度及連續(xù)監(jiān)測特性賦予您測試細胞信號傳導(dǎo)動態(tài)的能力,無論這個過程有多久。
如上左圖所示,我們將Calu-3細胞培養(yǎng)在阻抗檢測板中,隨后加入不同濃度的異丙腎上腺素(一種強效β腎上腺素受體拮抗劑,圖中青色所示)并觀察阻抗值的實時變化。如果我們將20分鐘時間點的數(shù)據(jù)做成柱狀圖(如中圖所示),可以看到藥物濃度組的阻抗值在那時已經(jīng)降到了低,而低藥物濃度組則已經(jīng)回復(fù)到了基線值。我們還可以探索不同機理的化合物對于細胞信號傳導(dǎo)的不同作用。如右圖所示,橘色標識的組胺處理組(100μM)很迅速地出現(xiàn)了短時間的阻抗值降低;而灰色標識的細胞松弛素處理組,由于其細胞周期停止及肌動蛋白合成受抑制,則表現(xiàn)出前高后低的阻抗變化規(guī)律。
MAESTRO Z*優(yōu)勢
Maestro Z是基于電極技術(shù)的實時細胞分析系統(tǒng)。具備新設(shè)計的內(nèi)置測試環(huán)鏡倉以及下一代數(shù)據(jù)采集和分析軟件。Maesto Z平臺為您的要時細胞分析提供完整的解決方案。
持續(xù)的細胞監(jiān)測
并行記錄96個樣本的阻抗,就算要做長達幾周的實時記錄也毫無壓力。實驗過程非侵入、無標記。*染料/報告子對細胞的影響,數(shù)據(jù)可靠性無需置疑。
強大的數(shù)據(jù)分析功能
AxIS Z軟件地簡化了您實驗的設(shè)定、執(zhí)行和分析等各個環(huán)節(jié)?,F(xiàn)在您可以全神貫注于科學(xué)本身,再也不用為數(shù)據(jù)分析發(fā)愁了。
實現(xiàn)原位檢測
無需繁復(fù)的細胞懸液制備(比如進行流式分析時),也不必破壞貼壁細胞的網(wǎng)絡(luò)形態(tài)。Maestro Z系統(tǒng)使得高通量樣本在正常生理環(huán)境下的實時數(shù)據(jù)睡手可得。
想看到您的樣本?
有些時候,您只是想在顯微鏡下看一眼自己的細胞樣本。Maestro Z 96孔用板的每個孔內(nèi)都設(shè)有細胞觀察窗口,方便您的操作。
Axion細胞實時監(jiān)測系統(tǒng)環(huán)境控制
另外購置一臺細胞培養(yǎng)箱?不存在的。
Maestro Z的內(nèi)置智能環(huán)境倉可以地控制溫度和二氧化碳濃度,省下您寶貴的實驗室空間和預(yù)算。另外這種設(shè)計還能從根本上杜絕電噪音和機械震動。一舉兩得。