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型號
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品牌
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廠商性質(zhì)
經(jīng)銷商
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所在地
上海市
更新時間:2018-09-12 09:52:08瀏覽次數(shù):1040
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【簡單介紹】
上海博華專業(yè)供應(yīng)各*及國產(chǎn)抗體,其質(zhì)量被全國各大院校科研機構(gòu)認可,作為戰(zhàn)略合作伙伴。為您提供優(yōu)質(zhì)的Phospho-cdc2 (Tyr15) 磷酸化周期素依賴激酶2抗體,詳情咨詢!
【詳細說明】
二硫蘇糖醇//DL-DITHIOTHREITOL (DTT)/0281-1KGelisa實驗步驟:1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標準孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內(nèi)配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時藍色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準確性,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后立即進行檢測。當然,如果有證標準物質(zhì)供應(yīng)充足或來源充足且價格低廉,還是使用有證標準物質(zhì)而不采用其他類型的工作標準,因為這樣可以提高測量結(jié)果的可信度。elisa加樣:加樣或加試劑時,請注意在吸取標本 / 標準品,酶結(jié)合物或底物時,*個孔與zui后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大,將會導(dǎo)致不同的 “預(yù)孵育"時間,從而明顯地影響到測量值的準確性及重復(fù)性。一次加樣時間(包括標準品及所有樣品)控制在10分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用多道移液器加樣。機體內(nèi)B細胞在抗原刺激下所產(chǎn)生的具特異性免疫功能的球蛋白。ELISA是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、牽9體的特異性反應(yīng)與酶對底物的高效催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗技術(shù)。有證標準物質(zhì)的特性量值的不確定度包含了物質(zhì)的不均勻性,實驗室內(nèi)、實驗室間的誤差,還包含了特性量在有效期內(nèi)的變化。因此,當使用者在有效期外使用或取樣量少于zui小取樣量時.都有可能造成不確定度大大增加,以致有證標準物質(zhì)的定值參數(shù)不再有效。因此,有證標準物質(zhì)必須嚴格遵守證書中給出的相應(yīng)信息規(guī)范使用。
名稱:二硫蘇糖醇
品牌:AMRESCO
Item Description:DL-DITHIOTHREITOL (DTT)
Code:0281-1KG
級別:生物技術(shù)級
CAS:
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Shelf Life from Date of Manufacture**:
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依照有關(guān)規(guī)定,中國用于藥品成品檢驗的標準品(對照品)來源有:一是中國藥品生物制品檢定所提供的標準品(對照品);二是其他國家的標準品(對照品);三是省級以上藥品檢驗所標定,并經(jīng)同級食品藥品監(jiān)管局批準的標準品(對照品)。因為在這個時期各種雜交瘤細胞同時旺盛生長,互相爭奪營養(yǎng)和空間,而產(chǎn)生抗體的細胞有被淹沒和淘汰的可能。elisa孵育:為防止樣品蒸發(fā),試驗時將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),酶標板加上蓋或覆膜,以避免液體蒸發(fā);洗板后應(yīng)盡快進行下步操作,任何時侯都應(yīng)避免酶標板處于干燥狀態(tài);同時應(yīng)嚴格遵守給定的孵育時間和溫度??寡迨斋@后,加 1/萬硫柳汞或 1/萬的疊氮鈉防腐,或加入等量的中性甘油,分裝小瓶,置-20℃以下的低溫保存,數(shù)月至數(shù)年內(nèi)抗體效價無明顯變化。注意避免反復(fù)凍融。elisa組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,緩沖液中可加入1μg/L蛋白酶抑制劑或50U/ml的Aprotinin(抑肽酶)。用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清置于-20度或- 70度保存,如有必要,可以將樣品濃縮干燥。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。有證標準物質(zhì)的特性量值的不確定度包含了物質(zhì)的不均勻性,實驗室內(nèi)、實驗室間的誤差,還包含了特性量在有效期內(nèi)的變化。因此,當使用者在有效期外使用或取樣量少于zui小取樣量時.都有可能造成不確定度大大增加,以致有證標準物質(zhì)的定值參數(shù)不再有效。因此,有證標準物質(zhì)必須嚴格遵守證書中給出的相應(yīng)信息規(guī)范使用。
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