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Hoechst33258染色試劑盒
  • Hoechst33258染色試劑盒

貨物所在地:江蘇南京市

更新時間:2024-06-02 21:00:05

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Hoechst33258染色試劑盒

 細胞凋亡熒光Hoechst 33258檢測試劑盒
(Apoptotic Cell Hoechst 33258 Detection Kit)
 Store at4 for one year
Expire date

一、試劑盒說明
細胞凋亡時產(chǎn)生zui顯著的變化是染色體固縮,DNA裂解使細胞核形態(tài)產(chǎn)發(fā)生變化。本試劑盒提供的熒光染料Hoechst 33258是一種無毒、水溶性雙苯咪唑類化合物,可作為熒光探針與DNA分子結(jié)合。在凋亡細胞中,細胞膜對Hoechst 33258的攝取增高,并且由于染色體高度濃縮,Hoechst 33258與之結(jié)合增強,染色呈強藍色熒光,而正常細胞只呈微弱熒光,死細胞則不被染色,由此可檢測出凋亡。
二、試劑盒組份
組份
KGA211(100 assays)
儲存條件
Hoechst 33258
1.0 mL
4,避光
Buffer A
25 mL
4
Hoechst 33258工作液的配制:使用前,取試驗盒中Hoechst 33258原液用蒸餾水稀釋10倍。
三、試劑盒以外自備儀器和試劑
熒光顯微鏡、低速離心機、微量移液器、1.5m L Microtube、載玻片、蓋玻片、4%甲醛溶液
四、使用注意事項
1.   染色時間嚴格控制,染色過久可導(dǎo)致假陽性。
2.   由于不同細胞對Hoechst 33258的攝取能力不同,該法不一定適用所有細胞。
五、操作方法
1.          用適當?shù)姆椒ㄕT導(dǎo)細胞凋亡;
2.          用冷Buffer A洗滌細胞二次,離心收集 106細胞于1.5mL微量離心管中;
(貼壁細胞原位固定染色)
3.          加入1mL 4%甲醛溶液用戶自備4固定細胞10min;
4.          離心去固定液,用Buffer A洗兩遍;離心后留50~100μL Buffer A重懸細胞;
5.          取上步驟50100μL細胞懸液涂片,自然晾干;
6.          滴加100μL Hoechst 33258工作液(備注1),室溫染色10 min,水沖凈晾干;
7.          以紫外光340nm波長激發(fā),熒光顯微鏡下觀察。

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