一、細(xì)胞基本屬性 | ||||
細(xì)胞名稱 | JAWSII小鼠骨髓 (未成熟)樹突狀細(xì)胞 | |||
種屬來源 | 小鼠 | |||
組織來源 | 骨髓 | |||
生長特性 | 貼壁/懸浮生長 | |||
形態(tài)特征 | 單核細(xì)胞 | |||
質(zhì)量檢測 | CD44免疫熒光染色為陽性,CD45免疫熒光染色為陰性,純度高于 90%,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等 | |||
產(chǎn)品規(guī)格 | 1x106cells/T25或1mL凍存管 | |||
培養(yǎng)基 | 小鼠骨髓 (未成熟)樹突狀細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | |||
培養(yǎng)條件 | 氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃ | |||
換液頻率 | 每2-3天換液一次 | |||
消化液 | 0.25% | |||
產(chǎn)品貨期 | 2左右 | |||
運(yùn)輸方式 | T25培養(yǎng)瓶/ 順豐快遞(包郵) | |||
供應(yīng)限制 | 于科學(xué)研究,絕不可作為動(dòng)物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用 | |||
背景介紹 | 小鼠脂肪干細(xì)胞采用膠原酶消化法制備而來,小鼠脂肪干細(xì)胞分離自脂肪組織;脂肪組織主要由大量群集的脂肪細(xì)胞構(gòu)成,聚集成團(tuán)的脂肪細(xì)胞由薄層疏松結(jié)締組織分隔成小葉;貯存的脂肪,在需要時(shí)可迅速分解成甘油和脂肪酸,經(jīng)血液輸送到各組織以供利用。它們影響胰島素敏感性、血壓水平、內(nèi)皮功能、纖溶活動(dòng)及炎癥反應(yīng),參與多種重要病理生理過程;脂肪組織已由過去單純作為能量儲(chǔ)存的器官而成為一個(gè)極其重要的內(nèi)分泌系統(tǒng)。脂肪干細(xì)胞(ADSCs)是一種具有多向分化潛能的干細(xì)胞,主要恢復(fù)組織細(xì)胞的修復(fù)功能,促進(jìn)細(xì)胞的再生,恢復(fù)年輕面容的同時(shí),身體機(jī)能也得到充分改善,有效改善亞健康、早衰等疾病,由內(nèi)而外真正的有效抵抗衰老。脂肪干細(xì)胞具有很多優(yōu)點(diǎn):①具有自我更新及多向分化的潛能;②來源充足;③對(duì)供區(qū)的創(chuàng)傷較小;④獲得率及體外擴(kuò)增速率高。脂肪干細(xì)胞是目前被廣泛應(yīng)用于組織工程領(lǐng)域中理想的種子細(xì)胞。 根據(jù)不同來源及分化階段,干細(xì)胞可分為胚胎干細(xì)胞和成體干細(xì)胞胚胎干細(xì)胞具有分化為多種不同組織的能力,但在倫理上存在爭議。成體干細(xì)胞因其來源廣泛、增殖能力強(qiáng)等特點(diǎn),現(xiàn)已成為組織工程學(xué)研究的種子細(xì)胞。其中,脂肪干細(xì)胞作為組織工程修復(fù)的種子細(xì)胞,因其具有來源豐富、取材容易、增殖能力強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn),正受到越來越多的關(guān)注。 脂肪干細(xì)胞形態(tài)類似成纖維細(xì)胞,具有較強(qiáng)的增殖能力。在一定的誘導(dǎo)條件下,可分化為脂肪細(xì)胞、成骨細(xì)胞、軟骨細(xì)胞、心肌細(xì)胞、上皮細(xì)胞等,具有多向分化潛能。 | |||
二、細(xì)胞培養(yǎng)操作 | ||||
收貨處理 | 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2,飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài) | |||
傳代密度 | 細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng) | |||
傳代代數(shù) | 可傳2-3代,建議收到細(xì)胞后盡快進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn) | |||
傳代比例 | 傳代建議1:2傳代,1:2傳代就是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)T25瓶或者2個(gè)6cm皿。不是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)10cm皿 | |||
傳代方法 | 1.吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次; 2.添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后,吸出多余消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后,再加入5ml培養(yǎng)基終止消化; 3.用吸管輕輕吹打混勻,按1:2比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng); 4.待細(xì)胞貼壁后,培養(yǎng)觀察;之后每2-3天換液一次新鮮的培養(yǎng)基。 | |||
備注:由于實(shí)驗(yàn)所用試劑、操作環(huán)境及操作手法的不同,以上方法僅供各實(shí)驗(yàn)室參考 客戶在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,有任何技術(shù)問題可以技術(shù)服務(wù)電話: 按 2,我們隨時(shí)給予解答。 | ||||
三、注意事項(xiàng) | ||||
重要提醒 | 1.培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。 2.在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。 3.傳代培養(yǎng)過程中,消化時(shí)間不宜過長,否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài)。 4.運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。 | |||
到貨須知 | 1.收到細(xì)胞后,首先觀察并拍照記錄細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,干冰運(yùn)輸?shù)募?xì)胞檢查干冰是否揮發(fā),細(xì)胞是否解凍,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時(shí)和我們聯(lián)系。 2.靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照(當(dāng)天以及第 2,3 天請拍照),記錄細(xì)胞狀態(tài) (所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。 3.由于運(yùn)輸?shù)脑?,部分?xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象。個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時(shí)和我們聯(lián)系,告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。 4.仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題,責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。 | |||
四、售后服務(wù) | ||||
重發(fā)標(biāo)準(zhǔn) | 1.細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問題,細(xì)胞丟失、瓶身破損、培養(yǎng)液嚴(yán)重漏液等,重發(fā); 2.收到細(xì)胞未開封,如出現(xiàn)污染狀況,重發(fā); 3.收到細(xì)胞3天內(nèi),發(fā)現(xiàn)污染問題,經(jīng)核實(shí)后,重發(fā); 4.常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置 2 小時(shí)后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,經(jīng)核實(shí)后,重發(fā); 5.常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置 22 小時(shí)并且未開封,出現(xiàn)污染,經(jīng)核實(shí)后,重發(fā); 6.細(xì)胞活性問題,請?jiān)谑盏疆a(chǎn)品 3 天內(nèi)給我們提出真實(shí)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,用臺(tái)盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力,經(jīng)核實(shí)后,重發(fā); 7.視具體情況而定。 | |||
不予重發(fā) | 1.客戶操作造成細(xì)胞污染,不重發(fā); 2.客戶嚴(yán)重操作失誤致細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā); 3.非我們推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā); 4.細(xì)胞狀態(tài)不好,未提供真實(shí)清晰的培養(yǎng)前 3 天的細(xì)胞狀態(tài)照片,不重發(fā); 5.細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題的,不重發(fā); 6.收到細(xì)胞發(fā)現(xiàn)問題與客服人員溝通的時(shí)間證明大于3天的,不重發(fā); 7.視具體情況而定。 |