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　　每個(gè)四級(jí)桿質(zhì)量分析器有三種工作方式：離子全通過(guò)、掃描和離子選擇監(jiān)測(cè)。全離子通過(guò)是指四級(jí)桿不施加直流電壓，這樣就不過(guò)濾離子，所有帶電離子全部通過(guò)；掃描是指在給定的質(zhì)荷比范圍內(nèi)，依次采集每個(gè)質(zhì)量數(shù)的信號(hào)；而選擇離子監(jiān)測(cè)模式，只是采集的某個(gè)或某幾個(gè)質(zhì)荷比的離子信號(hào)。

　　如果要用三重四級(jí)桿液質(zhì)聯(lián)用儀測(cè)試樣品，需要提前準(zhǔn)備什么呢？

　　1、選擇合適的電離方式

　　常用的電離方式是大氣壓電離源(API)，包括電噴霧(ESI)、大氣壓化學(xué)電離源(APCI)。

　　1.1大氣壓電噴霧離子源(ESI源)

　　原理：待測(cè)物經(jīng)液相分離，通過(guò)毛細(xì)管進(jìn)入電離源，被離子源的高壓電場(chǎng)電離，同時(shí)在脫溶劑氣和溫度的共同作用下霧化，最終形成霧狀的帶電液滴，隨著溶劑不斷蒸發(fā)，液滴的體積不斷變小，電荷在液滴中不斷富集，最終在富集到一定程度時(shí)，發(fā)生“庫(kù)倫爆炸”，把液滴炸碎，在多次爆炸后，待測(cè)物最終被離子化。

　　適用范圍：適合于離子型和極性分析物，靈敏度高，能給出分子量的信息，是目前常用的離子源；化合物無(wú)需具有揮發(fā)性；是分析熱不穩(wěn)定化合物的方法；能生成一系列多電荷離子，特別適用于蛋白、多肽類(lèi)生物大分子；流速控制在0.5mL/min內(nèi)。

　　1.2大氣壓化學(xué)電離源(APCI源)

　　原理：是常壓下的氣態(tài)化學(xué)電離過(guò)程。待測(cè)物通過(guò)毛細(xì)管?chē)婌F來(lái)霧化，同時(shí)在高溫和脫溶劑氣的共同作用下快速蒸發(fā)溶劑，然后電暈針尖端高壓放電，使經(jīng)過(guò)電暈針的待測(cè)物發(fā)生電離。

　適用范圍：適合于非極性至弱極性樣品，小分子樣品以及抗菌素和堿性藥物等，且具有一定的揮發(fā)性；在相對(duì)較高的流速下靈敏度更高。

　　2、正負(fù)離子化模式的選擇

　　正離子模式：適合于堿性化合物，可用甲酸或乙酸對(duì)樣品進(jìn)行酸化。樣品中含有仲氨或叔氨時(shí)可優(yōu)先考慮使用正離子模式。

　　負(fù)離子模式：適合于酸性化合物，可用氨水對(duì)樣品進(jìn)行堿化。樣品中含有較多的強(qiáng)伏電性基團(tuán)，如含氯、含溴和多個(gè)羥基時(shí)可嘗試使用負(fù)離子模式。

　　3、流動(dòng)相的選擇

　　常用的流動(dòng)相為甲醇、乙腈、水和它們不同比例的混合物及一些揮發(fā)性的緩沖鹽，如甲酸銨、乙酸銨等，濃度小于10mmol/L(過(guò)高會(huì)抑制離子源的信號(hào)和堵塞噴霧針及污染儀器);還可以加入易揮發(fā)酸堿如甲酸、乙酸和氨水調(diào)節(jié)PH，濃度小于1%。禁止使用不揮發(fā)性的磷酸鹽、硼酸鹽等(在離子源會(huì)沉淀并堵塞毛細(xì)管等)，禁止使用會(huì)抑制離子化過(guò)程的表面活性劑(表面活性劑產(chǎn)生的加合物和離子簇會(huì)干擾質(zhì)譜數(shù)據(jù)，因此不能使用洗滌劑清洗玻璃器皿等容器)、清潔劑和離子對(duì)試劑等，禁止使用鹽酸、硫酸等無(wú)機(jī)酸。

　　有機(jī)試劑必須為色譜級(jí)及以上，水用娃哈哈的純凈水。

　　送樣前一定要摸好LC條件，能夠基本分離。在液相上摸好的條件，注意尤其是流動(dòng)相的組成轉(zhuǎn)化成合適的LC-MS條件。

　　4、樣品前處理注意事項(xiàng)

　　由于液質(zhì)的流速較小(ESI一般為0.2mL/min)，所以配制樣品的溶劑極性強(qiáng)度不能太大，盡量小于起始比例，否則，會(huì)出現(xiàn)保留時(shí)間偏移等問(wèn)題。

　　樣品必須過(guò)0.22μm濾膜過(guò)濾，不得有顆粒物。

　　樣品的溶劑必須是色譜純，最好和流動(dòng)相比例一致。

　　樣品中不允許含有金屬離子、表面活性劑(不用洗潔精洗瓶子)、磷酸鹽、硼酸鹽等不揮發(fā)鹽。

　　樣品pH在5-7范圍內(nèi)，嚴(yán)禁含有無(wú)機(jī)或有機(jī)強(qiáng)酸強(qiáng)堿。

　　質(zhì)譜是靈敏度很高的儀器，進(jìn)樣濃度一定不能太高，1-2μg/mL左右就行，太高的濃度對(duì)儀器來(lái)說(shuō)容易造成殘留，而且定量不準(zhǔn)確。