產(chǎn)品名稱：第一鏈cDNA合成試劑盒
英文名稱：1st Strand cDNA Synthesis Kit

產(chǎn)品編號(hào)與包裝規(guī)格：

產(chǎn)品描述：第一鏈 cDNA 合成試劑盒（1st Strand cDNA Synthesis Kit）是以 mRNA 或者總 RNA 為模板， 效 合成第一鏈 cDNA。本試劑盒使用 Reverse Transcriptase 反轉(zhuǎn)錄酶（Cat.No: HKE123），它的 RNase H 的活性與 AMV 反轉(zhuǎn)錄酶相比較低。該反轉(zhuǎn)錄酶可耐受 42～50°C 溫度。試劑盒中含有重組RNA 酶抑制劑（Cat. No:HKE125），可耐受 55°C 高溫，有效防止RNA 降解；同時(shí)含有 Oligo(dT)18，用于以有 poly(A)尾 巴的mRNA 為模板合成 cDNA；本試劑盒也可采用基因特異性引物。合成的第一鏈 cDNA 能直接用作 PCR 或熒光定量 PCR 的模板，第 二鏈 cDNA 的合成或線 性 RNA 擴(kuò)增，也可用于需要用帶有放射性或非放射性核苷酸標(biāo)記第一鏈 cDNA 的實(shí)驗(yàn)。

產(chǎn)品特點(diǎn)：
      環(huán)凱生物反轉(zhuǎn)錄酶無(wú) RNase H 活性，可避免第一鏈 cDNA 合成過程中，RNA/DNA 雜交模板鏈中 RNA     解，保證 cDNA合成的質(zhì)量。 
      反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)可使用 Random N6 或 Oligo(dT)18 為引物，也可同時(shí)使用 Random N6 和 Oligo(dT)18 做引物，或使用基因特異性引物進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄。

保存溫度：-20℃。

產(chǎn)品包裝：

注意事項(xiàng)：
      1）用 DEPC 處理實(shí)驗(yàn)用到的所有實(shí)驗(yàn)器材，或購(gòu)買已經(jīng)證明無(wú)核酸酶的實(shí)驗(yàn)用具，實(shí)驗(yàn)過程戴手套并經(jīng)常更換手套，避免 RNA 酶的污染。
      2）確保所用試劑中無(wú) RNA 酶污染。
      3）試劑盒要嚴(yán)格密封保存。在反轉(zhuǎn)錄過程中，所有管子確?？蹏?yán)。
      4）純化過的 RNA 必須保證不含有鹽，金屬離子，乙醇和本酚，以上成分會(huì)干擾第一鏈 cDNA 合成反應(yīng)。可采用乙醇沉淀 RNA 的方法去除掉痕量污染物。
      5）為保證反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)有效進(jìn)行，需使用高質(zhì)量的 RNA 模板。
      6）有實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示，本反轉(zhuǎn)錄酶可在 15 分鐘內(nèi)完成 1kb 反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)。

操作方法：

常用PCR 循環(huán)：