六胺銀法染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)
實(shí)驗(yàn)原理:
利用氧化劑氧化細(xì)菌和真菌內(nèi)的細(xì)胞壁內(nèi)的粘多糖等成分而暴露出醛基酸基還原六胺銀內(nèi)的銀離子為黑色的金屬銀而顯色。同理,腎小球基膜內(nèi)含有一些多糖成分, 易于被氧化露出醃基而被染色。
實(shí)驗(yàn)步驟:
1、切片經(jīng)二 甲苯5min*2,無(wú)水乙醇5min*2、 95%乙醇6min*2、 85%乙醇5min、 70%乙醇5min完成脫蠟。脫蠟后自來(lái)水洗5min。
2、加入1%過(guò)碘酸水溶液中作用10min>自來(lái)水洗,然后蒸憶水洗二次,每次3min。
3、六氣銀液預(yù)熱至65t,切片放入其中浸染75min蒸餡水洗二次,每次3min。
4、用0.1%氯化金調(diào)色處理5min蒸憶水洗二次,每次3min。
5、用5%硫代酸鈉處理5min蒸惘水洗二次,每次3min。
6、用0.5%亮綠復(fù) 染細(xì)胞質(zhì)。
7、切片再經(jīng)70%乙醇、80%乙醇、90%乙醇各Imin:經(jīng)95%Z醇imin.換液重復(fù)-次;無(wú)水乙醇2min,換液重復(fù)一次快速脫水,后用二甲苯透明5min,換液重復(fù)一次。
8、根據(jù)蓋玻片規(guī)格和載玻片上組織多少,滴加適量中性樹(shù)膠,封片。
操作要求:
1、氧化切片很重要。氧化液種類(lèi)和濃度、作用時(shí)間影響陽(yáng)性結(jié)果的數(shù)量。
2、使用的容器應(yīng)保持清潔,才能保證結(jié)果的穩(wěn)定性。
結(jié)果判定:
細(xì)菌、真菌的粘多糖成分被染成深黑色,腎小球基膜也被染成深黑色,背景為淡綠色或無(wú)色。
[項(xiàng)目開(kāi)展范圍]慢病毒,腺病毒,RNAI類(lèi), 分子生物實(shí)驗(yàn),病理實(shí)驗(yàn),免疫學(xué)實(shí)驗(yàn),細(xì)胞實(shí)驗(yàn),動(dòng)物實(shí)驗(yàn),蛋白組學(xué)實(shí)驗(yàn),芯片類(lèi)實(shí)驗(yàn),并為廣大客戶(hù)朋友們提供課題設(shè)計(jì)指導(dǎo)、基金申請(qǐng)指導(dǎo)、SCI. 核心期刊等服務(wù)。
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