目錄:北京索萊寶科技有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒-微量法>>微量法生化試劑盒>> BC4225-100T/96S4-香豆酸:輔*A連接酶活性檢測(cè)試劑盒 微量
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更新時(shí)間:2024-04-15 09:37:38瀏覽次數(shù):588評(píng)價(jià)
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CAS | 詳詢 | 純度 | 詳詢 |
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分子量 | 詳詢 | 分子式 | 詳詢 |
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100T/96S |
貨號(hào) | BC4225 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),綜合 |
主要用途 | 4-香豆酸:輔*A連接酶(4CL)活性檢測(cè) |
4-香豆酸:輔*A連接酶(4CL)活性檢測(cè)試劑盒說明書
微量法
貨號(hào): BC4225
規(guī)格: 100T/96S
產(chǎn)品組成:使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致,有疑問請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。
試劑名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
提取液 | 液體60 mL×2瓶 | 2-8℃保存 |
試劑一 | 液體15 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑二 | 粉劑×1瓶 | -20℃保存 |
試劑三 | 液體3 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑四 | 粉劑×1瓶 | -20℃保存 |
試劑五 | 粉劑×1支 | 2-8℃保存 |
溶液的配制:
提取液:內(nèi)含不溶物,使用前搖勻;
試劑二:臨用前加入3 mL蒸餾水溶解,可以分裝后-20℃保存,避免反復(fù)凍融;
試劑四:臨用前用4 mL蒸餾水溶解備用,可以分裝后-20℃保存,避免反復(fù)凍融;
試劑五:加入1 mL乙醇溶解,臨用前用蒸餾水稀釋40倍后備用,現(xiàn)用現(xiàn)配;
工作液的配制:按體積比將試劑二:試劑三:試劑四:試劑五=1:1:1:1的比例配制工作液,現(xiàn)用現(xiàn)配。
產(chǎn)品說明:
4-香豆酸:輔*A連接酶(4-coumarate:CoA ligase,4CL)是木質(zhì)素生物合成的關(guān)鍵酶之一,主要催化肉桂酸及其羥基或者甲氧基衍生物生成相應(yīng)的輔*A酯,這些中間產(chǎn)物隨后進(jìn)入苯丙類衍生物支路合成途徑。該酶主要存在于高等植物、酵母和菌類中,研究該酶可以探討多種生物細(xì)胞發(fā)育過程中木質(zhì)素沉積的代謝機(jī)理,為減少水果石細(xì)胞含量而提高其品質(zhì)提供依據(jù)。4CL催化4-香豆酸和CoA生成4-香豆酸CoA,其在333nm下測(cè)有特征吸收峰,測(cè)定4-香豆酸CoA的生成速率,即可反映4CL活性。
注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
需自備的儀器和用品:
紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、低溫臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、微量石英比色皿/96孔UV板、可調(diào)式移液槍、研缽/勻漿器、EP管、冰和蒸餾水。
操作步驟:具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
注意事項(xiàng):
若ΔA大于0.5,將樣本用蒸餾水稀釋后再進(jìn)行測(cè)定。
建議一次測(cè)定不要測(cè)定過多樣本以免耽誤過多的酶促反應(yīng)時(shí)間。
空白管為檢測(cè)各試劑組分質(zhì)量的檢測(cè)孔,正常情況下,變化不超過0.01。
實(shí)驗(yàn)實(shí)例:
取0.1g芥菜加1mL提取液進(jìn)行樣本處理,取上清后按照測(cè)定步驟操作,使用微量石英比色皿測(cè)得ΔA測(cè)定管=A2測(cè)定管-A1測(cè)定管=0.7425-0.5851=0.1574,ΔA空白管= A2空白管-A1空白管=0,ΔA=ΔA測(cè)定管-ΔA空白管=0.1574,按樣本質(zhì)量計(jì)算酶活得:4CL(U/g 質(zhì)量)=476.19×ΔA÷W=476.19×0.1574÷0.1=749.52 U/g 質(zhì)量。
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