目錄:北京索萊寶科技有限公司>>生化檢測試劑盒-微量法>>微量法生化試劑盒>> BC4185-100T/96S莽草酸脫氫酶活性檢測試劑盒 微量法
| CAS | 詳詢 | 純度 | 詳詢 |
|---|---|---|---|
| 分子量 | 詳詢 | 分子式 | 詳詢 |
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100T/96S |
| 貨號 | BC4185 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),綜合 |
| 主要用途 | 莽草酸脫氫酶(SD)活性檢測 |
| 試劑名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
| 提取液 | 液體100 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 試劑一 | 液體10 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 試劑二 | 粉劑×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 試劑三 | 粉劑×1瓶 | -20℃保存 |
提取液：內(nèi)含不溶物，用前搖勻。
試劑二：臨用前加入5 mL蒸餾水溶解。
試劑三：臨用前每瓶加入10 mL蒸餾水溶解。
工作液的配制：根據(jù)用量按照試劑一：試劑二：試劑三為7:4:8的體積比例充分混勻，備用，用前25℃預(yù)熱15min。
紫外分光光度計/酶標儀預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長至340nm，紫外分光光度計蒸餾水調(diào)零。
工作液25℃預(yù)熱10min以上。
操作表：在微量石英比色皿/96孔UV板中分別加入下列試劑：
| 試劑名稱 | 空白管 | 測定管 |
| 工作液（µL） | 190 | 190 |
| 樣本（µL） | 10 | |
| 蒸餾水（µL） | 10 | |
| 加入樣本即開始計時，充分混勻后于340nm處測定20s時的吸光值A1和5min20s時的吸光值A2，計算ΔA測定管=A2測定-A1測定，ΔA空白管=A2空白-A1空白，ΔA=ΔA測定管-ΔA空白管（空白管只需做1-2次）。 | ||
按蛋白濃度計算
按樣本質(zhì)量計算
按細胞數(shù)量計算
按液體體積計算
樣本提取上清液置于冰上待測，且樣本提取完成后建議2h內(nèi)測完。
樣本的蛋白濃度需自行測定，由于提取液中含有一定濃度的蛋白（約1 mg/mL），所以測定樣本蛋白濃度時需扣除提取液自身蛋白濃度。
ΔA大于1時，建議將樣本稀釋后再進行測定。當ΔA小于0.01時，可以延長反應(yīng)時間（10min或15min）來測定。
空白管為檢測各試劑組分質(zhì)量的檢測孔，正常情況下，變化不超過0.01。
取0.1g稗草，加入1mL提取液，進行樣本處理，取上清按照測得步驟操作，用微量石英比色皿測得計算ΔA測定管=A2測定-A1測定=0.2771-0.2433=0.0338，ΔA空白管=A2空白-A1空白=0，ΔA=ΔA測定管-ΔA空白管=0.0338，按照樣本質(zhì)量計算得：SD酶活（U/g 質(zhì)量）=643×ΔA÷W=217.334 U/g 質(zhì)量。
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