目錄:北京索萊寶科技有限公司>>生化檢測試劑盒-微量法>>微量法生化試劑盒>> BC2325-100T/48S胃*白酶活性檢測試劑盒 微量法
參考價(jià) | 面議 |
參考價(jià) | 面議 |
更新時(shí)間:2024-04-11 09:42:07瀏覽次數(shù):469評(píng)價(jià)
聯(lián)系我們時(shí)請(qǐng)說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!
CAS | 詳詢 | 純度 | 詳詢 |
---|---|---|---|
分子量 | 詳詢 | 分子式 | 詳詢 |
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100T/48S |
貨號(hào) | BC2325 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),綜合 |
主要用途 | 測定意義:胃*白酶由胃粘膜主細(xì)胞分泌,分解食物中蛋白質(zhì)成小肽段。一般用于神經(jīng)性低 |
胃*白酶活性檢測
試劑盒說明書
微量法
貨號(hào):BC2325
規(guī)格:100T/48S
產(chǎn)品組成:使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致,有疑問請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。
試劑名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
提取液 | 液體50 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑一 | 粉劑×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑二 | 液體15 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑三 | 粉劑×1瓶 | 2-8℃保存 |
溶液的配制:
試劑一:臨用前加入10 mL試劑二,充分溶解;
試劑三:臨用前加入10 mL蒸餾水,充分溶解。
產(chǎn)品說明:
胃*白酶由胃粘膜主細(xì)胞分泌,分解食物中蛋白質(zhì)成小肽段。一般用于神經(jīng)性低酸癥的鑒別,慢性胃炎、慢性胃擴(kuò)張、慢性十二指腸炎等癥狀時(shí)也會(huì)引起胃*白酶分泌的減少。
胃*白酶可催化血紅蛋白水解,水解產(chǎn)物*氨酸在275nm下有特征吸收峰。通過測定吸光值的變化來計(jì)算酶活。
需自備的儀器和用品:
紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔UV板、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水。
注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測。
操作步驟:具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
一、樣本處理(可適當(dāng)調(diào)整待測樣本量,具體比例可以參考文獻(xiàn))
稱取約0.1g組織加入1mL提取液進(jìn)行冰浴勻漿或者0.1mL胃液加入0.9mL提取液。10000rpm 4℃離心10分鐘,取上清,置冰上待測。
二、測定步驟
分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min 以上,調(diào)節(jié)波長至275nm,蒸餾水調(diào)零。
操作表:
試劑名稱(μL) | 測定管 | 對(duì)照管 |
樣本 | 20 | - |
試劑一 | 100 | 100 |
混勻,37℃保溫10min。 | ||
試劑三 | 100 | 100 |
搖勻1min。 | ||
樣本 | - | 20 |
混勻后10000rpm 4℃ 離心10min,取上清用微量石英比色皿/96孔UV板測定A275nm。計(jì)算?A=A測定-A對(duì)照。 |
注意:對(duì)照管后加樣本,而測定管先加樣本
胃*白酶活性計(jì)算
用微量石英比色皿
1、按樣本蛋白濃度計(jì)算
活性單位定義:37℃下每毫克蛋白每分鐘催化血紅蛋白水解生成1μmol*氨酸為一個(gè)酶活單位。
胃*白酶酶活(U/mg prot)=(?A÷ε÷d×V反總)÷(Cpr×V樣本)÷T=0.786×?A÷Cpr
2、按樣本質(zhì)量計(jì)算
活性單位定義:37℃下每克組織每分鐘催化血紅蛋白水解生成1μmol*氨酸為一個(gè)酶活單位。
胃*白酶酶活(U/g 質(zhì)量)=(?A÷ε÷d×V反總)÷(W×V樣本÷V提)÷T=0.786×?A÷W
3、按液體體積計(jì)算
活性單位定義:37℃下每毫升液體每分鐘催化血紅蛋白水解生成1μmol*氨酸為一個(gè)酶活單位。
胃*白酶酶活(U/mL)=(?A÷ε÷d×V反總)÷(V樣本÷V提×V液)÷T= 7.86×?A
Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度(mg/mL),需要另外測定;W:樣本質(zhì)量,g;V反總:反應(yīng)總體積,0.22mL;V提:粗酶液總體積,1mL;T:催化反應(yīng)時(shí)間,10min;V樣本:加入樣本體積,0.02mL;V液:液體體積,0.1mL;ε:*氨酸吸光系數(shù),1.4μmol-1·mL·cm-1;d:光程,1cm。
B、用96孔UV板
1、按樣本蛋白濃度計(jì)算
活性單位定義:37℃下每毫克蛋白每分鐘催化血紅蛋白水解生成1μmol*氨酸為一個(gè)酶活單位。
胃*白酶酶活(U/mg prot)=(?A÷ε÷d×V反總)÷(Cpr×V樣本)÷T = 1.31×?A÷Cpr
2、按樣本質(zhì)量計(jì)算
活性單位定義:37℃下每克組織每分鐘催化血紅蛋白水解生成1μmol*氨酸為一個(gè)酶活單位。
胃*白酶酶活(U/g 質(zhì)量)=(?A÷ε÷d×V反總)÷(W×V樣本÷V提)÷T =1.31×?A÷W
3、按液體體積計(jì)算
活性單位定義:37℃下每毫升液體每分鐘催化血紅蛋白水解生成1μmol*氨酸為一個(gè)酶活單位。
胃*白酶酶活(U/mL)=(?A÷ε÷d×V反總)÷(V樣本÷V提×V液)÷T =13.1×?A
Cpr:粗酶液蛋白質(zhì)濃度(mg/mL),需要另外測定;W:樣本質(zhì)量,g;V反總:反應(yīng)總體積,0.22mL;V提:粗酶液總體積,1mL;T:催化反應(yīng)時(shí)間,10min;V樣本:加入樣本體積,0.02mL;V液:液體體積,0.1mL;ε:*氨酸吸光系數(shù),1.4μmol-1·mL·cm-1;d:光程,0.6cm。
實(shí)驗(yàn)實(shí)例:
取0.1g小鼠胃加入1mL提取液充分研磨,10000rpm 4℃離心10分鐘,取上清稀釋2倍,置冰上,按照測定步驟操作,使用微量石英比色皿測得計(jì)算?A=A測定-A對(duì)照=1.3345-1.2195=0.115,按樣本質(zhì)量計(jì)算酶活得:
胃*白酶酶活(U/g 質(zhì)量)=0.786×?A÷W×2(稀釋倍數(shù))=1.808 U/g 質(zhì)量。
相關(guān)系列產(chǎn)品:
BC2280/BC2285 酸性蛋白酶(ACP)活性檢測試劑盒
BC2290/BC2295 中性*白酶(NP)活性檢測試劑
胃*白酶活性檢測試劑盒 微量法 胃*白酶活性檢測試劑盒 微量法
(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)