目錄:北京索萊寶科技有限公司>>生化檢測試劑盒-微量法>>微量法生化試劑盒>> BC1185-100T/96S氧化型谷*甘肽(GSSG)含量檢測試劑盒 微量
CAS | 詳詢 | 純度 | 詳詢 |
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分子量 | 詳詢 | 分子式 | 詳詢 |
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100T/96S |
貨號 | BC1185 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),綜合 |
主要用途 | 測定意義:GSH/GSSG是細(xì)胞內(nèi)最重要的氧化還原對之一。因此,測定細(xì)胞內(nèi)GSH |
氧化型谷*甘肽含量檢測試劑盒說明書
微量法
注意:本產(chǎn)品試劑有所變動,請注意并嚴(yán)格按照該說明書操作。
貨號:BC1185
規(guī)格:100T/96S
產(chǎn)品組成:使用前請認(rèn)真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致,有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。
試劑名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
試劑一 | 液體110 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑二 | 液體130 μL×1支 | 2-8℃保存 |
試劑三 | 液體20 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑四 | 液體2.5 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑五 | 粉劑×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑六 | 液體12.5 μL×1支 | 2-8℃保存 |
標(biāo)準(zhǔn)品 | 粉劑×1支 | 2-8℃保存 |
溶液的配制:
試劑二:有毒易揮發(fā)試劑,涉及該試劑的步驟建議在通風(fēng)櫥內(nèi)操作。
試劑五:臨用前加入2.5 mL蒸餾水,溶解后-20℃分裝可保存4周,避免反復(fù)凍融。
試劑六工作液:先將試劑六內(nèi)液體離心至底部再用移液槍吹打混勻使用。臨用前根據(jù)樣本數(shù)量按照試劑六:蒸餾水=1μL:20μL(21μL,約10T)的比例配制備用,現(xiàn)用現(xiàn)配。
標(biāo)準(zhǔn)品:10mg氧化型谷*甘肽。臨用前加入1 mL蒸餾水,充分溶解,濃度為10 mg/mL,2-8℃可保存4周。
產(chǎn)品說明:
氧化型谷*甘肽(*)是谷*甘肽(GSH)的氧化形式,又稱為二硫代谷*甘肽,是兩分子的谷*甘肽氧化而成。*會被谷*甘肽還原酶還原成GSH,因此機(jī)體中大多數(shù)是以還原型形式存在。測定細(xì)胞內(nèi)GSH和*含量以及GSH/*比值,能夠很好地反映細(xì)胞所處的氧化還原狀態(tài)。本試劑盒利用谷*甘肽能和5,5’-二硫代-雙-(2-硝*甲酸)(5,5’-dithiobis-2-nitrobenoic acid,DTNB)反應(yīng)產(chǎn)生2-硝基-5-*甲酸,2-硝基-5-*甲酸在波長412nm處具有最大光吸收的特點,通過2-乙烯吡啶抑制樣本中原有的還原型谷*甘肽,然后利用谷*甘肽還原酶將*還原為GSH,借此測定氧化型谷*甘肽的含量。
技術(shù)指標(biāo):
低檢出限:3.211 μg/mL
線性范圍:3.9-125 μg/mL
注意:實驗之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計/酶標(biāo)儀、分析天平、低溫離心機(jī)、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、勻漿器/研缽/細(xì)胞超聲破碎儀、冰和蒸餾水。
操作步驟:具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
注意事項:
若不確定樣本中*含量的高低,可稀釋幾個梯度后再進(jìn)行測量。
如果測定吸光值超過線性范圍吸光值,可以增加樣本量或者稀釋樣本后再進(jìn)行測定。
因為試劑一中含有蛋白質(zhì)沉淀劑,因此上清液不能用于蛋白濃度測定。如需測定蛋白含量,需另取組織。
實驗實例:
取0.1064g大鼠肝臟加入1mL試劑一進(jìn)行冰浴勻漿,按照測定步驟操作,用96孔板測得計算ΔA測定= A2測定-A1測定=0.240-0.149=0.091,ΔA空白=A2空白-A1空白=0.118-0.114=0.004,ΔA測定-ΔA空白=0.087,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲y=0.0117x - 0.0122, R2=0.9989,x=8.479,按樣本質(zhì)量計算得:
*含量(μg/g 質(zhì)量)=x÷W =79.690 μg/g 質(zhì)量。
取0.1050g韭菜葉片加入1mL試劑一進(jìn)行冰浴勻漿,按照測定步驟操作,用96孔板測得計算ΔA測定= A2測定-A1測定=0.198-0.150=0.048,ΔA空白=A2空白-A1空白=0.118-0.114=0.004,ΔA測定-ΔA空白=0.044,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線y=0.0117x - 0.0122,R2=0.9989,x=4.803,按樣本質(zhì)量計算得:
*含量(μg/g 質(zhì)量)=x÷W =45.74 μg/g 質(zhì)量。
相關(guān)發(fā)表文獻(xiàn):
[1] Ming Song,Fangfang Chen,Yihui Li,et al. rimetazidine restores the positive adaptation to exercise training by mitigating statin-induced skeletal muscle injury. Journal of Cachexia, Sarcopenia and Muscle. November 2017;(IF10.754)
[2] Hua Li,Lanying Wang,Yanping Luo. Composition Analysis by UPLC-PDA-ESI (?)-HRMS and Antioxidant Activity Using Saccharomyces cerevisiae Model of Herbal Teas and Green Teas from Hainan. Molecules. October 2018;(IF3.06)
參考文獻(xiàn):
Alpert A J, Gilbert H F. Detection of oxidized and reduced glutathione with a recycling postcolumn reaction[J]. Analytical biochemistry, 1985, 144(2): 553-562.
Owens C W I, Belcher R V. A colorimetric micro-method for the determination of glutathione[J]. Biochemical Journal, 1965, 94(3): 705.
相關(guān)系列產(chǎn)品:
BC1170/ BC1175 還原型谷*甘肽(GSH)含量檢測試劑盒
BC1190/ BC1195 谷*甘肽過氧化物酶(GSH-Px/GPX)活性檢測試劑盒
BC0350/ BC0355 谷*甘肽S-轉(zhuǎn)移酶(GST)活性檢測試劑盒
BC1160/ BC1165 谷*甘肽還原酶(GR)活性檢測試劑盒
氧化型谷*甘肽(GSSG)含量檢測試劑盒 微量 氧化型谷*甘肽(GSSG)含量檢測試劑盒 微量
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