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目錄:北京索萊寶科技有限公司>>免疫學>>ELISA試劑盒>> SEKM-0057小鼠趨化因子配體6ELISA試劑盒

小鼠趨化因子配體6ELISA試劑盒
  • 小鼠趨化因子配體6ELISA試劑盒
參考價 面議
具體成交價以合同協(xié)議為準
參考價 面議
具體成交價以合同協(xié)議為準
  • 品牌 SOLARBIO/索萊寶
  • 型號 SEKM-0057
  • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)商
  • 所在地 北京市
屬性

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更新時間:2022-08-16 11:04:33瀏覽次數(shù):783評價

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 96T/48T
貨號 SEKM-0057 應(yīng)用領(lǐng)域 醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè)
主要用途 小鼠C10/CCL6含量測定
Solarbio ELISA 試劑盒采用基于雙抗體夾心法的酶聯(lián)免疫吸附檢測技術(shù)。小鼠趨化因子配體6ELISA試劑盒是將抗小鼠C10/CCL6單克隆抗體包被在酶標板上;分別加入梯度稀釋的標準品和預稀釋的樣本;洗板后加入生物素化抗小鼠C10/CCL6 抗體;后,在λmax=450 nm(OD=450 nm)處測定反應(yīng)孔樣品吸光度(OD),通過計算出樣本中小鼠C10/CCL6的濃度。?

 

小鼠趨化因子配體6ELISA試劑盒

注意事項:

1. 試劑盒應(yīng)在有效期內(nèi)使用,請不要使用過期的試劑。

2. 試劑盒未使用時應(yīng)保存在 2-8℃冰箱,已復溶但未用完的標準品,請丟棄。

3. 試劑盒使用前請在室溫恢復 30 min,且充分混勻試劑盒里的各種成份及制備的樣品。

4. 在試驗中標準品和樣本建議作復孔檢測,且加入試劑的順序應(yīng)保持*。

5. 為避免交叉污染,請在試驗中使用 1 次性試管,槍頭,封板膜(※)及潔凈塑料容器。.

6. 濃縮生物素化抗體和濃縮酶結(jié)合物的體積較少,在運輸過程中微量液體會沾到管壁及瓶蓋上,使用前請離心處理(5-10 S 即可),使管壁上的液體集中在管底部,取用時,請用移液器小心吹打幾次。

7. 除了試劑盒中的濃縮洗滌液和終止液可以通用外,請不要使用其他來源試劑盒內(nèi)含的試劑代替本試劑盒中的某單個組分。

8. 為保證結(jié)果準確,每次檢測均需做標準曲線。

安全提示:試劑盒中的終止液為酸性溶液,操作小鼠員在使用時請帶上手套并注意防護;在操作過程中也要避免試劑接觸皮膚和眼睛,如果不慎接觸,請用大量清水清洗;檢測血液樣本及其它體液樣本時,請按國家生物實驗室安全防護有關(guān)管理規(guī)定執(zhí)行。

 

 

 

小鼠趨化因子配體6ELISA試劑盒

樣本收集及儲存:

1. 細胞培養(yǎng)上清:將細胞培養(yǎng)基移無菌離心管,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲存),避免反復凍融。

2. 血清樣本:室溫血液自然凝固 20 min 后,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲存),保存過程中如有沉淀,請再次離心,避免反復凍融。

3. 血漿樣本:將全血收集到含抗血凝劑的管中,根據(jù)標本的實際要求選擇 EDTA,檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合 20 min,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24小時內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲存),避免反復凍融。

※注意:

血清血漿樣本避免使用溶血、高血脂樣本,以免影響檢測結(jié)果;如果樣本中的靶標物檢測濃度高于標準品的值,請將樣品做適當倍數(shù)稀釋后檢測,建議正式實驗前做預實驗以確定稀釋倍數(shù)。

試劑準備:

1. 試劑回溫:首先在實驗前 30 min 將試劑盒,待測樣本放置于室溫下,濃縮洗滌液如出現(xiàn)結(jié)晶,請放入37℃溫浴直到結(jié)晶全部溶解。

2. 配制洗滌液:預先計算好稀釋后的洗滌液使用體積,然后用雙蒸水或去離子水將 20 倍濃縮洗滌液稀釋成 1 倍應(yīng)用液,未用完的濃縮洗滌液放入 4℃冰箱保存。

3. 標準品梯度稀釋:加入標準品/樣本稀釋液(SR1)1000?L凍干標準品中,靜置15分鐘待其*溶解后輕輕混勻(濃度為2000pg/ml),按照以下濃度進行2倍稀釋:1000、500、250、125、62.5、31.25、15.63、0pg/ml進行稀釋。1000pg/ml作為標準曲線的點濃度,標準品/樣本稀釋液(SR1)作為標準曲線的零點(0pg/ml)。復溶過的標準品原液(2000pg/ml)未用完的應(yīng)廢棄或根據(jù)需要按照一次用量分裝,并將其貯存在-20~-80℃冰箱,具體如下圖。

 

4. 生物素化抗體工作液:預先計算好試驗所需用量,用檢測稀釋液(SR2)將100倍抗體濃縮液稀釋成1倍應(yīng)用工作液(稀釋前充分混勻),請在30分鐘內(nèi)加入到反應(yīng)孔中。

5. 酶結(jié)合物工作液:按每次試驗所需用量配制,用酶結(jié)合物稀釋液(SR3)將100倍濃縮酶結(jié)合物稀釋成1倍應(yīng)用工作液(稀釋前離心),請在30分鐘內(nèi)使用。

6. 洗滌方法:? 自動洗板:甩盡酶標板孔中液體,在厚迭吸水紙上拍干,注入洗滌液為 300ul/孔,注與吸出間隔為 30 秒,洗板 5 次。? 手工洗板:甩盡酶標板孔中液體,在厚迭吸水紙上拍干,用洗瓶加入洗滌液 300ul/孔,靜止30 秒后甩凈酶標板孔中液體,在厚迭的吸水紙上拍干,洗板 5 次。

C10 Mouse ELISA Kit

結(jié)果判斷:

?1.用酶標儀 450 nm 波長測定 OD 值。選擇雙波長檢測,參考波長為 630 nm。如不能進行雙波長檢測,請用 450 nm 的 OD 測定值減去 630 nm 的 OD 測定值。

2.計算標準品、樣品的平均 OD 值:每個標準品和標本的 OD 值應(yīng)減去零孔的 OD 值

3.以標準品濃度為橫坐標,吸光度OD值為縱坐標,用軟件繪制標準曲線,樣品中含量可通過對應(yīng)OD值由標準曲線換算出相應(yīng)的濃度。

4.若標本 OD 值高于標準曲線上限,應(yīng)做適當稀釋后重新檢測,計算濃度時再乘以稀釋倍數(shù)。

2. 靈敏度:低可檢測小鼠濃度達 8pg/ml,20 個零標準品濃度 OD 的平均值加上兩個標準差,計算相應(yīng)的可檢測濃度。

3. 特異性:不與小鼠 CCL3,CCL4,CCL9 等反應(yīng)。

4. 重復性:板內(nèi),板間變異系數(shù)<10%。

5. 回收率:在選取的健康小鼠血漿、細胞培養(yǎng)上清中加入 3 個不同濃度水平的小鼠 ,計算回收率。

 

6. 線性稀釋:分別在選取的 4 份健康小鼠血漿和細胞培養(yǎng)上清中加入高濃度小鼠 ,在標準曲線動力學范圍內(nèi)進行稀釋,評估線性。

小鼠趨化因子配體6酶聯(lián)免疫試劑盒

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