洗滌是elisa試劑盒測(cè)定過程中決定實(shí)驗(yàn)成敗的一個(gè)關(guān)鍵步驟。洗滌可采用洗板機(jī)或手工洗滌兩種方式,手工洗板則分為浸泡式和流水沖洗式洗滌。無論洗板方式如何,在向板孔內(nèi)注液時(shí)應(yīng)當(dāng)避免氣泡殘留孔內(nèi),否則會(huì)因洗滌液難以進(jìn)入孔中而影響洗滌效果。
洗滌目的是去除反應(yīng)體系中與反應(yīng)無關(guān)的成分、未結(jié)合的酶結(jié)合物以及反應(yīng)過程中非特異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。由于抗原和抗體的包被通常是在堿性條件下與固相的疏水鍵相互作用而被動(dòng)吸附于其上的,因此必須注意非離子去垢劑的使用濃度,常用的洗滌液是含0.05%吐溫20的0.02mol/L, pH 為7.4的 PBS液,如果洗滌液中的吐溫20超過 0.2%,可使包被于固相上的抗原或抗體解吸附而影響實(shí)驗(yàn)的測(cè)定下限。
洗滌是重要的步驟之一,如果洗滌出現(xiàn)了差錯(cuò),就會(huì)影響到實(shí)驗(yàn)的質(zhì)量。
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