研究背景:
小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的目前干細(xì)胞培養(yǎng)難點(diǎn)。小鼠的骨髓基質(zhì)細(xì)胞成分復(fù)雜,間充質(zhì)干細(xì)胞比率低,分離培養(yǎng)有一定的難度。陳博士在培養(yǎng)過程中就遇到該問題。他曾成功飼養(yǎng)成人和大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞。但新近培養(yǎng)的小鼠間充質(zhì)干細(xì)胞狀態(tài)就很差。按照自己的分析:細(xì)胞培養(yǎng)操作沒有問題,培養(yǎng)條件也不錯(cuò),試劑來源可靠。問題應(yīng)該出現(xiàn)在培養(yǎng)基配方上。陳博士以原來的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基為基礎(chǔ),按照導(dǎo)師的提點(diǎn),修改了配方,但細(xì)胞不好不壞。為此他們做了兩次正交,結(jié)果缺總不理想,細(xì)胞狀態(tài)并不穩(wěn)定。陳博士為此焦頭爛額,擔(dān)心下一步的實(shí)驗(yàn)無法進(jìn)行。經(jīng)朋友介紹找到上??婆d生物科技的。
解決方案:
上??婆d的干細(xì)胞技術(shù)專家了解了陳博士的情況,培養(yǎng)技術(shù)、取材和試劑來源等,覺得不存在大問題;問題主要的原因是培養(yǎng)基的成分配比。建議陳博士重新配制培養(yǎng)基或使用現(xiàn)成的*培養(yǎng)基。陳博士為了加快實(shí)驗(yàn)進(jìn)度,直接選用了上海科興小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基。
選用產(chǎn)品:小鼠間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基 (Catalog No. BW110014)
實(shí)施步驟:
1、 使用上??婆d的小鼠間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基,進(jìn)行原代的取材;
2、 同樣時(shí)間下,上??婆d的培養(yǎng)基的MSC細(xì)胞狀態(tài)明顯優(yōu)于自己配置的培養(yǎng)液;
3、 經(jīng)過傳代,細(xì)胞的狀態(tài)和增殖能力都很好;
4、 成功獲得了足夠進(jìn)行下一步實(shí)驗(yàn)所需的mouse MSC。
結(jié)果分析:細(xì)胞狀態(tài)良好,成梭狀、緊密分布,大小較均勻。目前已經(jīng)傳20代。對(duì)于這次走的彎路,陳博士感慨良多。要的完成課題實(shí)驗(yàn),就需要轉(zhuǎn)變觀念,合理利用和整合現(xiàn)有的各個(gè)優(yōu)勢資源,快速達(dá)到實(shí)驗(yàn)?zāi)繕?biāo)。
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