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凱氏定氮儀如何測定蛋白質(zhì)
凱氏定氮儀可以檢測和分析食品中蛋白質(zhì)和氮的含量,在食品質(zhì)檢部門發(fā)揮著重要的作用。下面為大家簡單介紹一下該儀器是如何進(jìn)行蛋白質(zhì)檢測的。
蛋白質(zhì)是鑒定飼料質(zhì)量時(shí)必測的常規(guī)營養(yǎng)指標(biāo)。而大部分的飼料廠中的飼料蛋白質(zhì)的測定一般是使用凱式定氮儀來進(jìn)行測定的,使用這種方法來進(jìn)行測定能夠保證測定的準(zhǔn)確度,但是測定的時(shí)候會花費(fèi)一定的時(shí)間,那么在使用凱氏定氮儀的時(shí)候是如何進(jìn)行測量的,本文就來進(jìn)行簡單的介紹一下:
1 樣品處理:精密稱取 0.2~2.0g 固體樣品或 2~5g 半固體樣品或吸取 10~20mL液體樣品(約相當(dāng)?shù)?/span> 30~40mg),移入干燥的 100mL 或 500mL 定氮瓶中,加入 0.2g 硫酸銅,3g 硫酸鉀及20mL硫酸,稍搖勻后于瓶口放一小漏斗,將瓶以45°角斜支于有小孔的石棉網(wǎng)上。小心加熱,待內(nèi)容物全部炭化,泡沫*停止后,加強(qiáng)火力,并保持質(zhì)瓶內(nèi)液體微沸,至液體呈藍(lán)綠色澄清透明后,再繼續(xù)加熱 0.5h。取下放冷,小心加 20mL 水。放冷后,移入 100mL容量瓶中,并用少量水洗定氮瓶,洗液并入容量瓶中,再加水至刻度,混勻備用。取與處理樣品相同量的硫酸銅、硫酸鉀、硫酸按同一方法做試劑空白試驗(yàn)。
2 按圖裝好定氮裝置,于水蒸氣發(fā)生瓶內(nèi)裝水至約2/3處,加甲基紅指示液數(shù)滴及數(shù)毫升硫酸,以保持水呈酸性,加入數(shù)粒玻璃珠以防暴沸, 用調(diào)壓器控制,加熱煮沸水蒸氣發(fā)生瓶內(nèi)的水。
3 向接收瓶內(nèi)加入 10mL2% 硼酸溶液及混合指示液1滴, 并冷凝管的下端插入液面下,吸取 10.0mL樣品消化稀釋液由小玻杯流入反應(yīng)室,并以 10mL 水洗滌小燒杯使流入反應(yīng)室內(nèi),塞緊小玻杯的棒狀玻塞。將 10mL40%氫氧化鈉溶液倒入小玻杯,提起玻塞使其緩緩流入反應(yīng)室,立即將玻塞蓋緊,并加水于小玻杯以防漏氣。夾緊螺旋夾,開始蒸餾。蒸氣通入反應(yīng)室使氨通過冷凝管而進(jìn)入接收瓶內(nèi),蒸餾 5min。移動(dòng)接受瓶,使冷凝管下端離開液面,再蒸餾1min。然后用少量水沖洗冷凝管下端外部。取下接收瓶,以 0.05N 硫酸或 0.05N 鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至灰色或藍(lán)紫色為終點(diǎn)。
凱氏定氮儀對蛋白質(zhì)的測定可以根據(jù)上述的方法進(jìn)行檢測,為用戶獲取食物質(zhì)量的詳情的提供重要的數(shù)據(jù)信息。
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