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透析袋簡介及處理

閱讀:7247      發(fā)布時(shí)間:2014-4-16
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透析袋簡介:

    透析技術(shù)自Thomas Graham 于1861年發(fā)明到現(xiàn)在已有一百多年的歷史,它已成為生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)室簡便,常用的分離純化技術(shù)之一。在生物大分子的制備過程中,去除鹽、少量有機(jī)溶劑、小分子雜質(zhì)、樣品濃縮和改變微量樣品的緩沖系統(tǒng)等都要用到透析技術(shù)。

    生物樣品的透析只需使用的半透膜即可完成。通常是將半透膜制成袋狀,將生物大分子樣品溶液置入袋內(nèi),浸入水或緩沖液中,樣品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋內(nèi),而鹽和小分子等物質(zhì)不斷擴(kuò)散透析到袋外,直到袋內(nèi)、外兩邊的濃度達(dá)到平衡。保留在透析袋內(nèi)未透析出的樣品溶液稱為“保留液”,袋(膜)外的溶液稱為“滲出液”或“透析液”。透析的動力是擴(kuò)散壓,擴(kuò)散壓是由橫跨膜兩邊的溶質(zhì)濃度梯度形成的。透析的速度同欲透析的小分子溶質(zhì)在膜內(nèi)外兩邊的濃度梯度、膜的面積和溫度成正比,與膜的厚度成反比。升高溫度可加快透析速度。為大限度地保持生物大分子的活性,通常采用4℃透析。 透析膜可用動物膜和玻璃紙等,但用的多的還是用纖維素制成的透析膜。目前較常用的是美國Union Carbide (聯(lián)合碳化物公司)和美國光譜醫(yī)學(xué)公司生產(chǎn)的各種尺寸的透析管,其截留分子量MwCO(即留在透析袋內(nèi)的生物大分子的小分子量,縮寫為MwCO)通常從700到數(shù)萬不等。 

    商品化的透析袋可制成管狀,其扁平寬度為6~50 mm不等。為防干裂,出廠前一般都經(jīng)10%的甘油處理,透析袋中含有微量的硫化物、重金屬和一些具有紫外吸收的雜質(zhì),它們對蛋白質(zhì)和其它生物活性物質(zhì)有害,用前必須除去。新購進(jìn)的透析袋必須經(jīng)過處理才能使用。50%的乙醇煮沸1小時(shí),再依次用50%乙醇、0.01 mol/L碳酸氫鈉和0.001 mol/L EDTA溶液洗滌,再用蒸餾水沖洗后即可使用。實(shí)驗(yàn)證明,50%乙醇處理對除去具有紫外吸收的雜質(zhì)特別有效。使用后的透析袋洗凈后可存于蒸餾水中,置4℃保存。若長時(shí)間不用,可加入適量的疊氮鈉(NaN2),以抑制微生物的生長。干的透析袋彎折時(shí)易出現(xiàn)裂口,用時(shí)必須仔細(xì)檢查。 

    經(jīng)過處理的透析袋,使用時(shí),一端用橡皮筋或線繩扎緊,也可以使用特制的透析袋夾夾緊,由另一端灌滿蒸餾水,用手指稍加壓,檢查是否漏液,確證無誤后,再用蒸餾水洗凈,方可裝入待透析樣品。裝入樣品時(shí)通常要留三分之一至一半的空間,以防透析過程中,因透析樣品中的小分子濃度較大,袋外的水和緩沖液過量進(jìn)入袋內(nèi)將袋漲破。含鹽量很高的蛋白質(zhì)溶液透析過液時(shí),體積增加是正常的,有時(shí)甚至可達(dá)50%以上。透析可以使用燒杯、量筒和塑料桶等容器,容器的大小以20-50:1為宜。少量樣品溶液的透析,可在袋內(nèi)放一截兩頭燒園的玻璃棒或兩端封口的玻璃管,以使透析袋沉入液面以下。 

    通常為了把握透析效果,有時(shí)需要對透析液中欲去除的小分子殘留物進(jìn)行分析,如甘氨酸、二甲基甲酰胺、甲醛、戊二醛、碳酸根、偶聯(lián)劑等。小分子殘留物的檢測分析方法很多,如 (NH4)2SO4可用1%的BaCl2檢查,NaCl、KCl等可用1%的AgNO3 檢查。有些檢測方法比較復(fù)雜,或需要一定的條件,如確有必要可參考相關(guān)文獻(xiàn)資料。

    為了加快透析速度,提高透析效率,除及時(shí)更換透析液外,還可使用磁力攪拌,還可以使用各種透析裝置。使用者也可以自行設(shè)計(jì)與制作各種簡易的透析裝置。美國生物醫(yī)學(xué)公司(Biomed Instruments Inc.)生產(chǎn)的各種型號的Zeineh 透析器,由于使用對流透析的原理,使透析速度和效率大大提高。 

附:透析袋的處理
 1. 根據(jù)需要,把透析管剪截成適當(dāng)長度(10—20cm)。
 2. 在大體積的2%(w/v)碳酸氫納和1mmol/L EDTA(pH8.0)中將透析管煮沸10分鐘。
 3. 用蒸餾水*清洗。
 4. 于EDTA(1mmol/L,pH8.0)中煮沸10分鐘, 
 5. 或?qū)⑼肝龉苤檬⒂姓麴s水的燒杯內(nèi),高壓蒸汽滅菌10分鐘。
 6. 冷卻后,存放于4℃。透析管必須確保始終浸于溶液中。
 7. 從此時(shí)起取用透析管時(shí)總須戴手套。
 8. 用前將透析管用蒸餾水清洗干凈后即可使用。

 

普通透析袋附錄:

貨號名稱產(chǎn)地規(guī)格單位
MD10-14透析袋MD10(8000-14000)D美國 Viskase5米/卷
MD25-14透析袋MD25(8000-14000)D美國 Viskase5米/卷
MD34-14透析袋MD34(8000-14000)D美國 Viskase5米/卷
MD44-14透析袋MD44(8000-14000)D美國 Viskase5米/卷
MD77-14透析袋MD77(8000-14000)D美國 Viskase5米/卷
MD34-7透析袋MD34 ( 7000 D )美國 Viskase5米/卷
MD34-3.5透析袋MD34 ( 3500 D )美國 Viskase5米/卷
MD44-3.5透析袋MD44 ( 3500 D )美國 Viskase5米/卷
TXDJZ-60透析袋夾子美國進(jìn)口60mm個(gè)
TXDJZ-40透析袋夾子美國進(jìn)口40mm個(gè)
TXDJZ-80透析袋夾子美國進(jìn)口80mm個(gè)

 

即用型透析袋附錄:

貨號名稱中文MWCO規(guī)格
131060Spectra/Por CE dialysis tubing,100-500 MWCO透析袋MD31(100)100-500D(道爾頓)0.5m
131096Spectra/Por CE dialysis tubing, 500-1000 MWCO透析袋MD31(500)500-1000D(道爾頓)0.5m
131204Spectra/Por CE dialysis tubing, 3500-5000 MWCO透析袋MD31(3500)3500-5000D(道爾頓)0.5m
131420Spectra/Por CE dialysis tubing, 100000 MWCO透析袋MD31(100000)100kD(10萬道爾頓)0.5m
131450Spectra/Por CE dialysis tubing, 300000 MWCO透析袋MD16(300000)300kD(30萬道爾頓)0.5m
131486Spectra/Por CE dialysis tubing, 1000000 MWCO透析袋MD16(1000000)1000kD(100萬道爾頓)0.5m
132636Spectra/Por 6 dialysis tubing, 1K MWCO透析袋MD18(1000)1KD(一千道爾頓)0.5m
132638Spectra/Por 6 dialysis tubing, 1K MWCO透析袋MD38(1000)1KD(一千道爾頓)0.5m
132640Spectra/Por 6 dialysis tubing, 1K MWCO透析袋MD45(1000)1KD(一千道爾頓)0.5m
132620Spectra/Por 6 dialysis tubing, 2K MWCO透析袋MD18(2000)2KD(二千道爾頓)0.5m
132625Spectra/Por 6 dialysis tubing, 2K MWCO透析袋MD38(2000)2KD(二千道爾頓)0.5m
132633Spectra/Por 6 dialysis tubing, 2K MWCO透析袋MD45(2000)2KD(二千道爾頓)0.5m
132590Spectra/Por 6 dialysis tubing, 3.5K MWCO透析袋MD18(3500)3.5KD(三千五道爾頓)0.5m
132592Spectra/Por 6 dialysis tubing, 3.5K MWCO透析袋MD45(3500)3.5KD(三千五道爾頓)0.5m
128058Spectra/Por 6 dialysis tubing, 8K MWCO,透析袋MD18(8000)8KD(八千道爾頓)0.5m
132582Spectra/Por 6 dialysis tubing, 8K MWCO,透析袋MD32(8000)8KD(八千道爾頓)0.5m
132586Spectra/Por 6 dialysis tubing, 8K MWCO,透析袋MD50(8000)8KD(八千道爾頓)0.5m
128118Spectra/Por 6 dialysis tubing, 10K MWCO透析袋MD18(10000)10KD(一萬道爾頓)0.5m
132574Spectra/Por 6 dialysis tubing, 10K MWCO透析袋MD32(10000)10KD(一萬道爾頓)0.5m
132576Spectra/Por 6 dialysis tubing, 10K MWCO透析袋MD45(10000)10KD(一萬道爾頓)0.5m
128158Spectra/Por 6 dialysis tubing, 15K MWCO透析袋MD18(15000)15KD(一萬五千道爾頓)0.5m
132564Spectra/Por 6 dialysis tubing, 15K MWCO透析袋MD32(15000)15KD(一萬五千道爾頓)0.5m
132566Spectra/Por 6 dialysis tubing, 15K MWCO透析袋MD45(15000)15KD(一萬五千道爾頓)0.5m
128218Spectra/Por 6 dialysis tubing, 25K MWCO透析袋MD18(25000)25KD(二萬五千道爾頓)0.5m
132554Spectra/Por 6 dialysis tubing, 25K MWCO透析袋MD34(25000)25KD(二萬五千道爾頓)0.5m
132544Spectra/Por 6 dialysis tubing, 50K MWCO透析袋MD34(50000)50KD(五萬道爾頓)0.5m
132680Spectra/Por 2 dialysis tubing, 12-14K MWCO透析袋MD45(12000-14000)12-14KD(1.2萬到1.4萬道爾頓)0.5m
1-0550-18H1 High Grade Membrane透析袋md18(5000)5kd0.5m
1-0550-30H1 High Grade Membrane透析袋md30(5000)5kd0.5m
1-0550-40H1 High Grade Membrane透析袋md40(5000)5kd0.5m

 

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