硝酸纖維素膜又稱為NC膜,在膠體金試紙中用做C/T線的承載體,同時(shí)也是免疫反應(yīng)的發(fā)生處。所以NC膜成為該試驗(yàn)中最重要的耗材。
我們大致了解后,回到最關(guān)心的問題,如何選擇膜?經(jīng)常會(huì)遇到的問題是,我是做某某項(xiàng)目的,我該選擇那類膜?
這里涉及到一個(gè)膜的分類標(biāo)準(zhǔn)問題,一個(gè)供應(yīng)商可能提供這個(gè)膜是8um,但另一個(gè)供應(yīng)商告訴你膜是135s的.這之間的區(qū)別與聯(lián)系是什么?
um指的是膜孔徑,而從上面膜的生產(chǎn)過程,我們可以看出,膜的孔徑實(shí)際上是沒有辦法界定的.由于干燥成型等過程的非絕對(duì)均一,膜的孔徑也是非均一的。
膜孔徑的說法實(shí)際上是沿用了一直以來的一個(gè)形象稱呼.而以秒為單位的定義為,每4cm膜,水的層析時(shí)間是s.該單位已經(jīng)越來越被各大廠商所接受,成為了一個(gè)通用的比較標(biāo)準(zhǔn).以下我們將采用s單位來進(jìn)行交流。
換算情況大致為:8um=135s;6um=180s.
不同秒數(shù)的膜對(duì)反應(yīng)有什么影響呢?
首先,我們分析一下液體在膜上的運(yùn)動(dòng)過程.一張長(zhǎng)度為4cm的膜,每隔1cm做一個(gè)標(biāo)記,當(dāng)液體運(yùn)動(dòng)過標(biāo)記處時(shí)記錄時(shí)間點(diǎn).那么你將會(huì)發(fā)現(xiàn)液體在膜上的運(yùn)動(dòng)是呈減速前行的。
而兩張不同秒數(shù)的膜(例如135s,180s)在同一時(shí)間標(biāo)記點(diǎn)處的運(yùn)動(dòng)速度不同.這個(gè)試驗(yàn)用清水做不好觀察,可以考慮用色素水溶液,非常明顯.
那么從這個(gè)試驗(yàn)可以看出,在通過同一T線噴點(diǎn)位置時(shí),金溶液通過的速度是快速膜>慢速膜.那么通過速度越快和包被在T線的物質(zhì)反應(yīng)時(shí)間也就越短,讀數(shù)快,那么靈敏度也就越低。
反之,反應(yīng)時(shí)間長(zhǎng),讀數(shù)慢,也就靈敏度高.同時(shí)還有一個(gè)問題是,反應(yīng)時(shí)間越長(zhǎng),發(fā)生非特異性結(jié)合的可能性就越大,所以過長(zhǎng)時(shí)間的反應(yīng)不一定就能夠真正的提升靈敏度.所以這里就有一個(gè)讀數(shù)時(shí)間/反應(yīng)靈敏度/非特異性結(jié)合的均衡。
其實(shí)我們并沒有那么多選擇.經(jīng)過使用實(shí)踐,各供應(yīng)商一般都只提供兩個(gè)型號(hào),就是135s和180s.雖然看到有些廠家的產(chǎn)品目錄上型號(hào)種類繁多,但這兩個(gè)型號(hào)的定貨量就占了95%以上,其他型號(hào)供貨上也就遠(yuǎn)不如這兩個(gè)型號(hào)來得順利。
135s一般用在雙抗體夾心法,180s一般用在競(jìng)爭(zhēng)法。你所要做的是,先選擇其中的一個(gè)型號(hào),然后比較不同供應(yīng)商同一個(gè)型號(hào)的差異,由于前面說的添加配方與你的試驗(yàn)條件配合的不同,這個(gè)差異可能大也可能小。具體要根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果來確定最后的選擇。
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