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UHPLC反相色譜柱在使用緩沖液的過程中要注意的幾點

時間:2019-1-4 閱讀:2688
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UHPLC反相色譜柱采用高純和高機械強度的硅膠,采用先進的鍵合技術(shù)制備而成, 色譜柱表面鍵合率高,覆蓋*,對堿性和酸性化合物具有良好的峰形。色譜柱柱容量高,壽命長,是一款具有較高性價比的色譜柱。
 
UHPLC反相色譜柱性能優(yōu)點:
(1) 在正相和反相中都能有應(yīng)用
(2) 穩(wěn)定的高覆蓋率的單鍵合相,充分封端球型
(3) 較低的疏水性,由于氰基的存在,具有*的選擇性
(4) 與裸硅膠不同的選擇特性;與裸硅膠柱相比,色譜柱的平衡時間快。
 
UHPLC反相色譜柱在使用緩沖液的過程中還要注意以下幾點:
a.避免使用鹽酸鹽,鹽酸鹽對鋼質(zhì)有腐蝕作用;
b.緩沖液要現(xiàn)配現(xiàn)用,往往緩沖液是良好的菌類培養(yǎng)液,隔天或放置長時間實驗時會發(fā)生很多怪現(xiàn)象;
c.使用緩沖液要及時掌握pH范圍,做到胸中有數(shù);
d.清洗液路和柱子時,有溫控可加熱到30攝氏度易于沖洗;
e.長時間用緩沖溶液要注意觀察接頭處有無析出,若有白色鹽類析出,定期用10%硝酸沖洗液路可以避免液路的堵塞;
f.選擇緩沖液要用可靠的試劑,避免不純的鹽類造成不必要的麻煩;過渡流動相是指有機相和水相的組成與分析流動相相同,但是不含緩沖鹽的溶液。
 
UHPLC反相色譜柱為色譜柱提供方便、經(jīng)濟和有效的保護,延長了色譜柱的壽命,保證分析結(jié)果的重現(xiàn)性。隨著使用時間的增加,液相色譜柱分離效能下降,柱壓增高,其原因主要是由于色譜柱進口段的少量填料被污染引起的,而色譜柱整個柱床并未被破壞,使用保護柱,相當于在色譜柱前增加了一段額外的填料,起到了保護整個色譜柱的作用。

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