什么是凱氏定氮法？

簡(jiǎn)單地說(shuō)，凱氏定氮法是一種檢測(cè)物質(zhì)中“氮的含量”的方法。蛋白質(zhì)是一種含氮的有機(jī)化合物，食品中的蛋白質(zhì)經(jīng)硫酸和催化劑分解后，產(chǎn)生的氨能夠與硫酸結(jié)合，生成硫酸氨，再經(jīng)過(guò)堿化蒸餾后，氨即成為游離狀態(tài)，游離氨經(jīng)硼酸吸引，再以硫酸或鹽酸的標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行滴定，根據(jù)酸的消耗量再乘以換算系數(shù)，就可以推算出食品中的蛋白含量。

凱氏定氮儀/定氮法原理
凱氏定氮法首先將含氮有機(jī)物與濃硫酸共熱，經(jīng)一系列的分解、碳化和氧化還原反應(yīng)等復(fù)雜過(guò)程，zui后有機(jī)氮轉(zhuǎn)變?yōu)闊o(wú)機(jī)氮硫酸銨，這一過(guò)程稱(chēng)為有機(jī)物的消化。為了加速和*有機(jī)物質(zhì)的分解，縮短消化時(shí)間，在消化時(shí)通常加入硫酸鉀、硫酸銅、yang hua gong、過(guò)氧化氫等試劑，加入硫酸鉀可以提高消化液的沸點(diǎn)而加快有機(jī)物分解，除硫酸鉀外，也可以加入硫酸鈉、氯化鉀等鹽類(lèi)類(lèi)提高沸點(diǎn)，但效果不如硫酸鉀。硫酸銅起催化劑的作用。凱氏定氮法中可用的催化劑種類(lèi)很多，除硫酸銅外，還有yang hua gong、汞、硒粉、鉬酸鈉等，但考慮到效果、價(jià)格及環(huán)境污染等多種因素，應(yīng)用zui廣泛的是硫酸銅。使用時(shí)常加入少量過(guò)氧化氫、次氯酸鉀等作為氧化劑以加速有機(jī)物氧化。消化完成后，將消化液轉(zhuǎn)入凱氏定氮儀反應(yīng)室，加入過(guò)量的濃氫氧化鈉，將NH4+轉(zhuǎn)變成NH3，通過(guò)蒸餾把NH3驅(qū)入過(guò)量的硼酸溶液接受瓶?jī)?nèi)，硼酸接受氨后，形成四硼酸銨，然后用標(biāo)準(zhǔn)鹽酸滴定，直到硼酸溶液恢復(fù)原來(lái)的氫離子濃度。滴定消耗的標(biāo)準(zhǔn)鹽酸摩爾數(shù)即為NH3的摩爾數(shù)，通過(guò)計(jì)算即可得出總氮量。在滴定過(guò)程中，滴定終點(diǎn)采用甲基紅-次甲基藍(lán)混合指示劑顏色變化來(lái)判定。測(cè)定出的含氮量是樣品的總氮量，其中包括有機(jī)氮和無(wú)機(jī)氮。
反應(yīng)式如下：

1.有機(jī)物中的氮在強(qiáng)熱和CuSO4，濃H2SO4 作用下，消化生成（NH4）2SO4 

反應(yīng)式為： 

  H2SO4==SO2+H2O+[O]

                      R. CH.COOH+[O]==R.CO.COOH+NH3

                         NH3

                      R.CO.COOH+[O]==nCO2+mH2O

                      2NH3+H2SO4==（NH4）2SO4

2.在凱氏定氮器中與堿作用，通過(guò)蒸餾釋放出NH3 ，收集于 H3BO3 溶液中

反應(yīng)式為： 

 2NH4++OH-==NH3+H2O

                      NH3+H3BO3==NH4++H2BO3-

3. 再用已知濃度的HCI標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定，根據(jù)HCI消耗的量計(jì)算出氮的含量，然后乘以相應(yīng)的換算因子，既得蛋白質(zhì)的含量。

反應(yīng)式為： 

 H2BO3-+H+==H3BO3

蛋白質(zhì)是一類(lèi)復(fù)雜的含氮化合物，每種蛋白質(zhì)都有其恒定的含氮量[約在14％~18％，平均為16％（質(zhì)量分?jǐn)?shù)）]。凱氏定氮法測(cè)定出的含氮量，再乘以系數(shù)6.25，即為蛋白質(zhì)含量。