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淺析高速逆流色譜一些特點(diǎn)
閱讀:2228發(fā)布時(shí)間:2022-9-19
高速逆流色譜屬于逆流色譜的范疇,它的主要分離原理是利用樣品在固定相和流動(dòng)相之間的差異也就是分配比不同而進(jìn)行分離的,值得注意的是逆流色譜的固定相和流動(dòng)相都是液體,其主要優(yōu)點(diǎn)是沒有傳統(tǒng)色譜的死吸附,樣品的回收率高等特點(diǎn)。
逆流色譜源于逆流分溶法,也就是用實(shí)驗(yàn)室經(jīng)常使用的分液漏斗進(jìn)行連續(xù)的液液萃取,根據(jù)樣品在兩種互不相溶的溶劑中分配比不同而進(jìn)行分離。
高速逆流色譜(high speed countercurrentchromatography,簡(jiǎn)稱HSCCC)是一種液-液色譜分離技術(shù),它的固定相和流動(dòng)相都是液體,沒有不可逆吸附,具有樣品無損失、無污染、高效、快速和大制備量分離等優(yōu)點(diǎn)。由于HSCCC與傳統(tǒng)的分離純化方法相比具有明顯的優(yōu)點(diǎn),因此此項(xiàng)技術(shù)己被廣泛應(yīng)用于中藥成分分離、保健食品、生物化學(xué)、生物工程、天然產(chǎn)物化學(xué)、有機(jī)合成、環(huán)境分析等領(lǐng)域。
高速逆流色譜作為一種分離方法,影響因素主要有溶劑體系的選擇,旋轉(zhuǎn)速度,流動(dòng)相的流速,溫度等影響。
溶劑體系選擇即條件的摸索,相當(dāng)于傳統(tǒng)色譜摸流動(dòng)相的條件,不同的是高速逆流色譜條件的摸索主要是指樣品在固定相和流動(dòng)相兩者之間的分配的比值,待分離的樣品的K值*好在0.6~1.5范圍之內(nèi),樣品才會(huì)有一個(gè)好分離效果。
轉(zhuǎn)速主要體現(xiàn)在固定相的保留率上,一般轉(zhuǎn)速越高固定相保留率也比較高,分離效果也相對(duì)的好一些。流速要適中,太大會(huì)降低固定相保留率,太低會(huì)容易拖尾。溫度是一個(gè)非常重要的參數(shù),溫度恒定對(duì)體系的重復(fù)性有著決定性的影響,比如說冬天,夏天可能同一個(gè)溶劑體系就會(huì)有著不同的分離效果。
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