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技術(shù)文章

Peprotech細胞因子其他常見問題

點擊次數(shù):1820 發(fā)布時間:2021-7-22

其他常見問題

● Peprotech細胞因子的穩(wěn)定性如何? 

除特殊說明之外,Peprotech的細胞因子或重組蛋白均以凍干粉形式提供,這使得細胞因子或重組蛋白在室溫條件下便非常穩(wěn)定。盡管如此,還是建議將細胞因子或重組蛋白置于-20℃或-80℃儲存,可穩(wěn)定數(shù)年。

重懸后的細胞因子或重組蛋白,在4℃條件下可短期儲存1-2周左右的時間,具體請參考具體產(chǎn)品的COA。若要長期儲存,需使用含載體蛋白的溶液稀釋已重懸的細胞因子或蛋白,分裝后請置于-20℃或-80℃儲存。為避免蛋白部分變性,在凍存期間請避免重復(fù)凍融循環(huán)。

 

● PeproTech細胞因子的內(nèi)毒素水平如何? 

PeproTech大部分無動物成分級別細胞因子的內(nèi)毒素水平均保證低于0.01 ng/µg蛋白,即0.1 EU/µg蛋白。對于大多數(shù)非無動物成分級別的細胞因子,內(nèi)毒素水平保證低于0.1 ng/µg蛋白,即1 EU/µg。事實上許多細胞因子的實際內(nèi)毒素含量均低于說明書上標注的內(nèi)毒素水平。

 

● ED50和units/mg均用來表示比活性(specific activity),兩者之間有什么關(guān)聯(lián)? 

ED50的定義是可誘導(dǎo)50%最大反應(yīng)的細胞因子濃度,而比活性(specific activity)是單位重量蛋白樣品中所含的活性單位。比活性單位(Specific Activity Units)只能用于表示蛋白的效能,且僅適用于劑量反應(yīng)曲線為S形的蛋白。以ng/ml為單位的ED50和以units/mg為單位的比活性之間的換算公式為:
Peprotech細胞因子其他常見問題

 

● 比活性單位(specific activity units)和活性的國際單位(International Units)之間有什么關(guān)聯(lián)?

比活性單位和國際單位(IU)之間沒有直接的關(guān)聯(lián),不能相互換算。

國際單位(IU)是與國際標準品的活性單位(即IU/ng)比對后得出的活性數(shù)值,后者是在世界衛(wèi)生組織(WHO)領(lǐng)導(dǎo)的國際合作研究中確定的。WHO國際標準品由英國國家生物制品檢定所(NIBSC)制備和提供。

簡單地與國際標準品比對而得出的蛋白活性國際單位(IU)常會出現(xiàn)偏差,原因是每個蛋白廠家所用的活性檢測方法很難一致,從而導(dǎo)致與國際標準品比對后得到的國際單位(IU)值相互間不具可比性。想要實現(xiàn)真正的可比性,必須建立標準的活性檢測方法,以保證所得出的蛋白活性國際單位(IU)值僅與蛋白的質(zhì)量有關(guān),而與蛋白的來源無關(guān)。
 

● PeproTech是怎樣得到蛋白活性的國際單位(IU)值的? 

在可能的情況下,PeproTech通過將自己的產(chǎn)品與對應(yīng)的WHO標準品在自已的生物活性測試中進行多次平行比對來得出國際單位(IU)值。多次對比可保證我們能夠排除因測試本身的不穩(wěn)定性(如產(chǎn)品批次,使用方法和測試方案等的變異性)而導(dǎo)致的異常值的出現(xiàn)。經(jīng)多次比對得出的結(jié)果可對我們產(chǎn)品的國際單位(IU)值進行可靠的定量。

 

● 為什么收到Peprotech的細胞因子之后,在產(chǎn)品管中看不到任何蛋白團塊或粉末狀產(chǎn)品? 

與市場上的許多蛋白產(chǎn)品不同,PeproTech的產(chǎn)品中不含任何載體蛋白和其它添加物(如BSA, HSA和蔗糖等),并且常在最di含鹽量的溶液中凍干,結(jié)果是微量的蛋白在凍干過程中會沉積在管壁上,形成蛋白薄膜,有時肉眼觀察不到。建議在打開管蓋前用小離心機快速離心20-30秒,使附著在管蓋或管壁上的蛋白聚集于管底。盡管可能看不到蛋白團塊,但Peprotech的質(zhì)控程序保證每管中的蛋白含量準確無誤。


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